高脂飲食對原發(fā)性高血壓大鼠的氧化損傷及其血壓變化機制的初步探討.pdf

1、原發(fā)性高血壓(EssentialHypertension)指的是由于多種遺傳或者環(huán)境因素引起的血壓持續(xù)升高的病理狀態(tài)，該病的發(fā)生和病人的年齡有著密切的關(guān)系，在發(fā)達和發(fā)展中國家，25％到35％的成年人患有此病，而70歲以上的老年人，發(fā)病率更是達到了60％到70％。原發(fā)性高血壓可以并發(fā)其他的心血管疾病，而高脂血癥就是一種常見的并發(fā)癥。研究表明，脂質(zhì)代謝紊亂與高血壓通常是合并存在的，高血壓患者比血壓正常者有更高的膽固醇水平[WilliamsR

2、R，1988；JuliusS，1990]，血壓與血脂之間存在著生物學(xué)上的相互關(guān)聯(lián)[BonaaKH，1991]。血脂異常與高血壓相關(guān)性的流行病學(xué)也證實血膽固醇水平和血壓間存在正相關(guān)[CastelliWP，1986；LaurenziM，1990]。因此，研究高血壓合并高脂血癥，具有一定的實際意義和針對性，因為這更好地體現(xiàn)了高血壓患者本身的病理特征，但是，國內(nèi)外關(guān)于高血壓及高脂血癥之間關(guān)系的研究，直接的實驗證據(jù)還不是很多。因此，在本論文中，作

3、者通過建立高血壓合并高脂血癥大鼠模型，研究該病理條件對原發(fā)性高血壓大鼠(SHR)靶器官的氧化損傷情況，并初步探討了高脂血癥狀態(tài)下SHR大鼠血壓變化的部分機制。 本文的創(chuàng)新之處主要有以下幾點：一，國內(nèi)外關(guān)于大鼠血漿纖溶活性測定的報道較少，而SHR作為原發(fā)性的高血壓動物模型，其體內(nèi)是否存在纖溶紊亂，尚無報道。另外，本文中對高血壓合并高脂血癥狀態(tài)下NO/ET系統(tǒng)和纖溶系統(tǒng)的聯(lián)合研究也屬首次；二，在主動脈平滑肌細胞的培養(yǎng)方法上，本課題沒

4、有參照常規(guī)的組織塊貼壁法或者酶消化法進行細胞培養(yǎng)，而是經(jīng)過反復(fù)摸索，采用了動脈環(huán)培養(yǎng)技術(shù)，而且直接采用了提取自模型大鼠的血清來作用細胞，可以更好的在細胞水平模擬大鼠體內(nèi)的病理狀態(tài)，并取得了較好的效果。 全文主要分為以下三個部分：一，動物水平：研究高脂飲食對原發(fā)性高血壓大鼠靶器官的氧化損傷情況。以WKY大鼠和SHR大鼠作為實驗對象，通過高脂飲食誘導(dǎo)，建立高血壓合并高脂血癥大鼠模型，實驗共分四組：正常組(N)，單純高血壓組(S)，單

5、純高脂組(N+L)和并發(fā)癥組(S+L)，實驗8周以后用生化方法檢測大鼠主要靶器官氧化損傷。結(jié)果表明：并發(fā)癥組大鼠血壓持續(xù)上升，并顯著高于單純高血壓組和單純高脂組，其他各組大鼠血壓趨于穩(wěn)定；和單純高血壓組相比，并發(fā)癥組大鼠有明顯的脂肪肝癥狀。各組大鼠主要臟器中均有AGEs積累，以并發(fā)癥組積累最多，該組大鼠體內(nèi)GSH含量大幅減少，以心臟和肝臟最為顯著(p＜0.001)，而主要臟器MDA含量普遍上升，SOD的活性和GSH具有相同的變化趨勢。

6、 二，組織水平：探討SHR大鼠并發(fā)高脂血癥后主動脈NO/ET系統(tǒng)和血纖溶系統(tǒng)的變化，研究該狀態(tài)下大鼠主動脈內(nèi)皮損傷情況。建立上述高血壓合并高血脂大鼠模型，以主動脈為研究對象，用試劑盒檢測實驗各組大鼠血清NO和ET-1的含量，以及主動脈iNOs和cNOs的活力和氧化損傷情況，研究高血壓并發(fā)高脂血癥狀態(tài)下大鼠體內(nèi)NO/ET系統(tǒng)的變化；用ELISA法研究大鼠纖溶功能，檢測tPA和PAI-1的含量，研究該病理條件下大鼠血管纖溶功能的變化。

7、結(jié)果顯示：高血壓大鼠并發(fā)高脂血癥后，血清中NO含量明顯降低，血漿ET水平升高，t-PA活性下降；血清AGEs積累逐漸增多，主動脈中GSH顯著減少，SOD活性降低，MDA含量上升，而主動脈壁cNOs活性下降極為顯著(p＜0.001)。 三，細胞水平：模擬SHR大鼠腎細胞和平滑肌細胞所處的高脂血癥狀態(tài)，觀察高脂血清對兩種細胞生長增殖，氧化應(yīng)激，能量代謝和離子轉(zhuǎn)運的影響。培養(yǎng)WKY大鼠和SHR大鼠腎細胞主動脈平滑肌細胞，WKY大鼠的細

8、胞分為正常組(N)和單純高脂組(N+L)，SHR大鼠的細胞分為單純高血壓組(S)和并發(fā)癥組(S+L)，分別用前面動物實驗中相應(yīng)的四組大鼠血清作用。實驗結(jié)果顯示：采用50ul高脂血清作用24小時，可以顯著促進SHR大鼠腎細胞和平滑肌細胞增殖；S+L組腎細胞的LDH和NAG的泄漏量顯著高于N組和S組，而平滑肌細胞的NAG泄漏無差異；對于S+L組來說，兩種細胞中GSH含量明顯低于S組，而MDA和O2-含量顯著高于后者；采用高脂血清作用后，SH

9、R大鼠腎細胞Na+K+-ATP酶和平滑肌細胞Ca2+Mg2+-ATP酶的活力和對照組相比均顯著下降。 綜上可以得出以下結(jié)論：一，連續(xù)八周的高脂飲食可以導(dǎo)致大鼠血脂明顯增加，形成高脂血癥。高脂血癥對高血壓大鼠病情產(chǎn)生惡化作用，臟器氧化損傷嚴重，這種損傷可能間接引起了原發(fā)性高血壓大鼠血壓的升高；二，SHR大鼠并發(fā)高脂血癥后引起的血壓持續(xù)升高主要是由內(nèi)源性NO/ET系統(tǒng)的失衡引起的，體內(nèi)氧化應(yīng)激水平和纖溶功能的變化促進了主動脈內(nèi)皮的損

10、傷，使NO/ET系統(tǒng)進一步惡化，最終引起內(nèi)皮依賴的血管舒張功能減弱，血管外周阻力升高，導(dǎo)致血壓上升；三，高脂血清可以促進SHR大鼠腎細胞和平滑肌細胞增殖，其中平滑肌的增殖是高血壓發(fā)展的重要征兆；細胞氧化應(yīng)激水平增加，膜通透性增強，能量代謝處于較低水平，損傷嚴重；腎細胞膜Na+-K+離子轉(zhuǎn)運出現(xiàn)障礙，平滑肌細胞膜Ca2+轉(zhuǎn)運能力下降。由于體內(nèi)條件下腎臟Na+潴留和平滑肌Ca2+內(nèi)流增多均是高血壓發(fā)生和發(fā)展的重要因素，因此在高血壓合并高脂血