香椿子總多酚降血糖作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的:通過提取、純化得到香椿子多酚總提取物,并對其體外抗氧化作用進(jìn)行研究;觀察香椿子總多酚對鏈尿佐菌素誘導(dǎo)的糖尿病小鼠及大鼠的降血糖作用,并且從糖代謝、抗氧化及對胰腺的保護(hù)等方面對其降血糖機(jī)制進(jìn)行研究。
　　方法:(1)提取、純化及含量測定:香椿子進(jìn)行適當(dāng)粉碎、浸泡、75％乙醇提取, AB-8大孔樹脂純化,福林酚法測定多酚含量。
　　(2)采用還原K3Fe(CN)6法對香椿子總多酚提取物的總還原力進(jìn)行測定,并測定香椿子總多酚

2、對feton反應(yīng)產(chǎn)生的羥基自由基(·OH)、鄰苯三酚自氧化產(chǎn)生的超氧陰離子自由基(O2·-)和Fe2+誘發(fā)卵黃低密度脂蛋白(LDL)多不飽和脂肪酸(PUFA)過氧化產(chǎn)生的烷氧基(LO·)和烷過氧基(LOO·)的清除作用,來研究香椿子總多酚的體外抗氧化作用。
　　(3)香椿子總多酚對糖尿病小鼠降血糖作用研究:昆明小鼠,雄性,隨機(jī)分組,將其中一組(10只)作為正常對照組,其余禁食不禁水12h后,150mg/kg腹腔注射鏈尿佐菌素建立糖

3、尿病模型,血糖大于11.1mmol/L者確定為糖尿病小鼠模型。將糖尿病小鼠模型隨機(jī)分為5組,每組10只,分別為模型組、鹽酸二甲雙胍組、香椿子多酚高(100mg/kg)、中(80mg/kg)、低劑量(60mg/kg)組,給藥14天,觀察小鼠進(jìn)食量、進(jìn)水量及體重變化,14天后測定空腹血糖值,臟器系數(shù),小鼠肝臟勻漿測定SOD、MDA、肝糖原含量。
　　(4)香椿子多酚對糖尿病大鼠降血糖作用研究:SD大鼠,雄性,隨機(jī)分組,將其中一組(8只

4、)作為正常對照,其余大鼠禁食不禁水12h后,腹腔注射鏈尿佐菌素55mg/kg,72h后測定空腹血糖,血糖值大于11.1mmol/L,確定為大鼠糖尿病模型。將成模的大鼠隨機(jī)分為模型組、格列本脲組(10mg/kg)、香椿子多酚高(75mg/kg)、低劑量(45mg/kg)組。灌胃14天,灌胃期間記錄大鼠進(jìn)食量、進(jìn)水量、尿量及體重變化,第14天后禁食不禁水12h,10％水合氯醛麻醉,腹主動脈取血,離心取血清測定空腹血糖值(FBG)、糖化血清蛋

5、白(GSP)、血清胰島素(INS)、C肽、大鼠血清氧化指標(biāo)(血清SOD、MDA、NO);同時測定大鼠血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶;肝臟HE染色觀察肝臟病理變化;胰腺多聚甲醛固定,切片、HE和免疫組化染色,觀察胰島結(jié)構(gòu)及胰島素表達(dá)。
　　結(jié)果:(1)經(jīng)過純化共得到香椿子多酚7.0145g,沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)曲線為Y=0.0607x+0.1503 R2=0.9924香椿子醇提取物中多酚含量為3.461％經(jīng)樹脂純化后多酚含量為49.04％。

6、r>　　(2)香椿子多酚具有良好的還原能力,對羥基自由基(·OH)、超氧陰離子自由基(O2·-)和烷氧基(LO·)和烷過氧基(LOO·)均有明顯的抑制作用,且呈一定的量效關(guān)系。香椿子多酚對羥自由基、超氧陰離子自由基、和抗脂質(zhì)過氧化清除活性 SC50值分別為:0.290mg/ml、65.62μg/ml、10.71μg/ml,比 Vit C清除自由基能力弱,但是總還原能力強(qiáng)于Vit C。
　　(3)香椿子多酚能降低鏈尿佐菌素誘導(dǎo)的糖尿

7、病小鼠的血糖,對正常小鼠血糖沒有降低作用。香椿子多酚能降低糖尿病小鼠肝臟臟器指數(shù),增加糖尿病小鼠肝糖原含量,可能機(jī)制為降低肝臟MDA含量,增加SOD含量。
　　(4):與模型組相比,香椿子多酚能夠改善糖尿病大鼠癥狀,對糖尿病大鼠體重沒有顯著增高;降低FBG、GSP;提高INS和C肽含量;降低MDANO含量,提高SOD含量;改善大鼠胰島形態(tài),提示香椿子多酚對胰腺有保護(hù)作用;香椿子多酚不能降低ALT及AST含量;高劑量組能顯著降低大鼠