IFNα-2b對K562細胞增殖、細胞周期及ERK基因表達的影響.pdf

1、【目的】
　　 通過研究IFNα-2b對人慢性粒細胞白血病急變期細胞系K562細胞增殖、細胞周期以及ERK基因(ERK mRNA)表達的影響,探討IFNα-2b治療白血病的機制及ERK在慢性髓系白血病發(fā)生發(fā)展中的作用,為尋找白血病治療的新途徑提供基礎(chǔ)支持。
　　 【方法】
　　 1.體外培養(yǎng)白血病細胞株K562細胞,取對數(shù)生長期的細胞用于實驗研究。
　　 2.應用CCK-8試劑盒檢測不同濃度(0萬 U/m

2、l、0.25萬U/ml、0.5萬U/ml、1萬U/ml、2萬 U/ml、4萬U/ml)的IFNα-2b在不同作用時間(24h、36h、48h、72h)對K562細胞增殖的影響。
　　 3.應用流式細胞術(shù)檢測IFNα-2b作用48小時前后K562細胞周期的變化。
　　 4.應用Real time-PCR技術(shù)檢測不同濃度(0萬U/ml、0.25萬U/ml、0.5萬U/ml、1萬U/ml)IFNα-2b作用48小時后K562細

3、胞中ERK mRNA表達水平的變化。
　　 【結(jié)果】
　　 1.CCK-8法結(jié)果顯示:IFNα-2b作用于K562細胞后,細胞的增值抑制率隨時間的延長而逐漸升高,同一濃度不同時間之間比較,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);IFNα-2b濃度在0萬U/ml～1萬U/ml之間變化時,細胞增殖抑制率隨藥物濃度的增加而增大,同一時間不同濃度組之間比較,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);繼續(xù)增加藥物濃度,細胞增殖抑制率增加不明顯,

4、差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 2.流式細胞術(shù)結(jié)果顯示:K562細胞為高s期細胞。IFNα-2b作用于K562細胞后,G1期細胞比率較作用前升高,S期細胞比率下降,藥物作用前后組問比較有明顯差異(P＜0.05)。
　　 3.Real time-PCR技術(shù)檢測不同濃度IFNα-2b對K562細胞ERK mRNA表達水平的影響,發(fā)現(xiàn)隨著IFNα-2b濃度增加,K562細胞中ERK mRNA表達逐漸增高,各不同藥物濃