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文檔簡介
1、[目的]
通過研究IFNα-2b對人慢性粒細(xì)胞白血病急變期細(xì)胞系K562細(xì)胞增殖、黏附、整合素β1的表達(dá)以及FAK mRNA表達(dá)的影響,探討?zhàn)じ饺毕輽C(jī)制在髓系白血病發(fā)生發(fā)展中的作用,試圖尋找白血病治療的新思路。
[方法]
1.體外培養(yǎng)白血病細(xì)胞株K562細(xì)胞,取對數(shù)生長期細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)研究。
2.應(yīng)用MTT法觀察IFNα-2b對K562細(xì)胞增殖的影響。
3.流式細(xì)胞術(shù)檢
2、測IFNα-2b作用前后K562細(xì)胞整合素β1的表達(dá)水平。
4.應(yīng)用Cyto Tox96 R Non-Radioactive Cytotoxicity Assay Kit試劑盒檢測IFNα-2b對K562細(xì)胞黏附功能的影響。
5.應(yīng)用RT-PCR技術(shù)檢測不同濃度IFNα-2b對K562細(xì)胞FAK mRNA表達(dá)水平的影響。
[結(jié)果]
1.細(xì)胞增殖抑制率結(jié)果顯示:不同濃度的IFNα-2
3、b作用于白血病K562細(xì)胞,不同的時間點(diǎn),其抑制率不同。其中作用48小時時,抑制率最大,與12、24、36、72小時時間點(diǎn)相比,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。并且隨濃度的增加,其抑制率增加,當(dāng)濃度增加到1萬U/ml時,抑制率最大,與終濃度0.25,0.5萬U/ml相比,差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),但繼續(xù)增加濃度時,抑制率增加不明顯,與終濃度2,4萬U/ml相比,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
2.通過流式
4、細(xì)胞術(shù)檢測到K562細(xì)胞高表達(dá)整合素β1,表達(dá)率約為95%。1萬U/ml IFNα-2b作用于K562細(xì)胞48小時整合素β1的表達(dá)水平與對照組相比明顯降低,差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。
3.K562細(xì)胞與纖維粘連蛋白的黏附率很低,1萬U/ml IFNα-2b作用48小時后K562細(xì)胞與纖維粘連蛋白的黏附率與對照組相比明顯增高,差異具有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。
4.RT-PCR技術(shù)檢測不同濃度
5、IFNα-2b對K562細(xì)胞FAK mRNA表達(dá)水平的影響,發(fā)現(xiàn)0.5,1,2萬U/ml IFNα-2b組可上調(diào)K562細(xì)胞FAK mRNA表達(dá)水平,與對照組相比,差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。其中1萬U/ml IFNα-2b組FAK mRNA表達(dá)水平最高,各濃度組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。0.25萬U/ml IFNα-2b組與對照組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
[結(jié)論]
1
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