Rab39A的定位和功能研究.pdf

1、Rab蛋白屬于Ras超家族,是其中最大的家族。在哺乳動物細(xì)胞中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)70種以上的Rab或Rab相似蛋白。Rab通過結(jié)合GTP或GDP的轉(zhuǎn)換發(fā)揮分子開關(guān)的作用,調(diào)控細(xì)胞囊泡的形成、靶向、黏附和融合,在細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)運輸中具有非常重要的功能。Rab功能異常與很多疾病的發(fā)生相關(guān)。Rab39A是一種新發(fā)現(xiàn)的Rab蛋白,其性質(zhì)和生物學(xué)功能還未被詳細(xì)研究。本文擬探討Rab39A在細(xì)胞中的定位及其細(xì)胞生物學(xué)功能。
　　研究結(jié)果表明,Rab39A

2、在人類組織中廣泛表達(dá)。免疫熒光實驗結(jié)果顯示Rab39A主要分布于晚期內(nèi)體和溶酶體。并且過表達(dá)Rab39A誘導(dǎo)晚期內(nèi)體和溶酶體的聚集,該作用依賴于GTPase活性。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)knockdown Rab39A使晚期內(nèi)體和溶酶體分散,延遲MCF7細(xì)胞中EGF.Rhodamine和EGF誘導(dǎo)的EGFR.的降解,并且抑制HeLa/CTSD-Myc細(xì)胞中CTSD-Myc的分泌,但是不影響CTSD-Myc的成熟。GST pulldown系統(tǒng)篩查與

3、RILP相互作用的Rab蛋白發(fā)現(xiàn)RILP是Rab39A的效應(yīng)因子。RILP通過羧基端與Rab39A作用,其作用依賴于GTPase活性,不依賴于Rab7。因此Rab39A可能通過募集RILP調(diào)節(jié)晚期內(nèi)體和溶酶體的分布與功能。
　　我們的實驗表明Rab39A定位于晚期內(nèi)體和溶酶體,可能通過募集RILP,進(jìn)而調(diào)節(jié)晚期內(nèi)體和溶酶體的運輸,影響晚期內(nèi)體和溶酶體的分布,調(diào)節(jié)CTSD-Myc的分泌以及內(nèi)吞途徑中EGFR在溶酶體的降解。我們的工作