2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、杜果是世界五大熱帶水果之一,也是我國(guó)著名的熱帶水果。為了弄清我國(guó)杜果主栽品種及地方品種的親緣關(guān)系,探索早期快速鑒定優(yōu)良單株的方法。本論文選用一種簡(jiǎn)便、快速、可靠的分子標(biāo)記——ISSR技術(shù),探討其在杧果的親緣關(guān)系、遺傳多樣性、品種鑒定以及在豐亡果炭疽病和生理病害早期鑒定中的應(yīng)用。主要研究結(jié)果如下: 1、改良了杧果基因組DNA的提取方法,提取出的杜果基因組DNA質(zhì)量高,適合于ISSR擴(kuò)增;葉綠體DNA的提取是采用先提取葉綠體,再經(jīng)過(guò)

2、蔗糖梯度(70%.60%.45%.30%.)純化,然后采用CTAB法裂解葉綠體得到高純度的葉綠體DNA。 2、優(yōu)化了適于杧果屬植物ISSR擴(kuò)增的反應(yīng)體系和反應(yīng)程序:總體積20 μ L,10mmo l/L Tris-HCI(pH 8.3),50mmoI/L KCI,1.5mmo I/L MgCI<,2>,0.2mmo I/L dNTP,0.25 μmoI/L primer,1 UгTaq poIymerase(TakaraBiot

3、echno Iogy,Japan),60ng DNA。擴(kuò)增反應(yīng)的程序:94℃5min預(yù)變性:94、C 1min,47℃-53℃(葉綠體DNA是50℃-55℃)1min,72℃2min,40個(gè)循環(huán):72℃延伸10 min。 3、從120條ISSR引物中篩選出20條條帶清晰、多態(tài)性豐富的引物用于基因組DNA擴(kuò)增;從50條lSSR引物中篩選出8條適合于葉綠體DNA擴(kuò)增的引物,其中有7條是基因組DNA和葉綠體DNA共有的引物。

4、4、從30個(gè)引物中篩選出6個(gè)多態(tài)性好的ISSR引物建立DNA指紋圖譜用于區(qū)分呂宋杜品種(系)。分析DNA指紋圖譜,發(fā)現(xiàn)這6個(gè)引物中每個(gè)引物都能區(qū)分呂宋系列品種(系),呂宋杜和其它供試的7個(gè)品種(系)同源性低,而這7個(gè)品種(系):高州呂宋杧、湛江呂宋杧、田陽(yáng)香杧、金錢杧、柳州呂宋杧、粵西一號(hào)、攀西紅呂宋同源性較高,可歸為一類。表明lSSR—PCR技術(shù)對(duì)杧果品種(系)的鑒定非常有效,能區(qū)分親緣關(guān)系很近的品種(系)。 5、以38個(gè)杧果

5、栽培種、扁桃、冬杧為試材,并從42個(gè)lSSR引物中篩選出9個(gè)多態(tài)性好的引物進(jìn)行l(wèi)SSR-PeR研究,聚類分析發(fā)現(xiàn)所有供試的23個(gè)廣西地方品種與秋豐亡、馬切蘇杧、象牙杧和愛(ài)文杧歸為一個(gè)大類,而且廣西本地杧果品種之間的親緣關(guān)系較近。 6、對(duì)廣西農(nóng)科院果樹(shù)資源圃的33個(gè)杧果品種和2個(gè)近緣種扁桃、冬杧分別進(jìn)行基因組DNA和葉綠體DNA lSSR分析。選出多態(tài)性好的7個(gè)lSSR共有引物,用UP(3MA進(jìn)行聚類分析,若以0.73為相似系數(shù)分

6、界點(diǎn),葉綠體DNA ISSR把35個(gè)樣品分為四類,而基因組DNA-lSSR將35個(gè)樣品歸為二類。雖然葉綠體DNA ISSR比基因組DNA ISSR擴(kuò)增的條帶數(shù)少,但是它的多態(tài)性比率卻高于基因組ISSR(79.4%vs 70.7%)。在杧果親緣關(guān)系分析上,葉綠體DNA lSSR分析優(yōu)于基因組DNA ISSR分析。 7、利用ISSR技術(shù)鑒別柁果生理病害。從42條ISSR引物中選用9條引物,對(duì)20個(gè)杜果樣品進(jìn)行ISSR-PCR研究,探

7、討其與果實(shí)生理病害關(guān)系。結(jié)果表明:20個(gè)杧果品種聚類為兩組,8個(gè)患果實(shí)生理病害的品種聚類為一組,12個(gè)不表現(xiàn)果實(shí)生理病害的品種聚類為另一組。根據(jù)這一結(jié)果,可利用這9條引物對(duì)杜果品種是否易患生理病害進(jìn)行早期初步鑒定。 8、利用I SSR技術(shù)鑒別杧果炭疽病。從120條ISSR引物中選用8個(gè)ISSR的引物,對(duì)臺(tái)農(nóng)一號(hào)、水英達(dá)、愛(ài)文、海頓等20個(gè)杧果品種進(jìn)行炭疽病抗病性分析,結(jié)果顯示I SS--POR聚類關(guān)系與杧果炭疽病的抗性有很大的相

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