復(fù)方鱉甲軟肝片對非酒精性脂肪肝的保護作用及機制研究.pdf

1、目的：觀察大鼠在非酒精性脂肪肝形成過程中肝細胞核因子(HNF4α)與過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPARα)表達的變化，旨在探討非酒精性脂肪肝發(fā)生機制中HNF4α與PPARα的作用。應(yīng)用中藥復(fù)方鱉甲軟肝片治療大鼠非酒精性脂肪肝，觀察其對HNF4α與PPARα表達的影響。
　　方法：雄性SD大鼠32只，隨機分為正常組、模型組（非酒精性脂肪肝組）、自然恢復(fù)組（對照組）與復(fù)方鱉甲軟肝片組（鱉甲組）。模型組、對照組和鱉甲組大鼠采用高脂高

2、糖飲食制備非酒精性脂肪肝大鼠模型，造模時間為12周。造模成功后，對照組大鼠給與蒸餾水灌胃8周，鱉甲組大鼠給予0.6g/kg/d劑量復(fù)方鱉甲軟肝片灌胃8周，同時給與普通飼料飲食。實驗結(jié)束時殺鼠取血，測定血清谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）、及游離脂肪酸（FFA）；取肝組織，測定肝組織中超氧化物岐化酶（SOD）、丙二醛（MDA）；取肝臟,行HE染色

3、與電鏡標(biāo)本制備，光鏡下觀察肝組織的病理變化，電鏡下觀察肝細胞超微結(jié)構(gòu)變化；采用免疫組化檢測肝組織HNF4α的表達情況；免疫組化法檢測肝組織HNF4α的表達情況和實時熒光定量法檢測肝組織中HNF4α基因和PPARα基因的表達。
　　結(jié)果：與正常組比較，模型組大鼠血清中TC、LDL、FFA明顯增高，HDL明顯降低，而ALT及AST的變化不明顯；與對照組比較，鱉甲組大鼠肝臟TG、TC、LDL、HDL與FFA水平無明顯差異，無統(tǒng)計學(xué)意義。

4、肝組織中SOD活力和MDA水平結(jié)果顯示，與正常組比較，模型組肝組織SOD活力明顯下降，MDA的含量明顯升高；與對照組比較，鱉甲組肝組織SOD活力明顯升高，MDA的量明顯降低。免疫組化結(jié)果顯示HNF4ɑ在各組大鼠肝臟表達無差異。實時熒光定量結(jié)果顯示，與正常組比較，模型組 HNF4α和PPARα在肝臟 mRNA水平的表達明顯降低；與對照組比較，鱉甲組HNF4α和PPARα在肝臟mRNA水平的表達有所升高，但無統(tǒng)計學(xué)意義。統(tǒng)計學(xué)相關(guān)性分析顯示