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文檔簡介
1、目 的:探討油酰乙醇胺(OEA)(過氧化物酶體增殖物激活受體-α的內(nèi)源性激動劑)對非酒精性脂肪肝的作用及可能機制。
方 法:以0.25mM 油酸造模 HepG2細胞24h,MTT法測定細胞活性,油紅O染色觀察細胞內(nèi)脂滴儲積、測定細胞培養(yǎng)液中ALT/AST和細胞TG含量。給予OEA及陽性對照藥非諾貝特干預4、8h,應用實時定量PCR檢測脂代謝相關基因的表達,同時觀察給藥12h后細胞內(nèi)脂滴蓄積情況,及細胞內(nèi)TG含量變化。
2、> 結 果:
(1)0.25mM油酸造模24h對細胞活性無顯著影響,且油紅O染色顯示細胞內(nèi)有明顯紅色脂滴蓄積。與對照組相比,模型組細胞培養(yǎng)液中ALT未見有顯著性變化(P=0.18),AST含量明顯增高[(11.74±0.263)U/Lvs(13.29±0.4638)U/L,P<0.05),]細胞內(nèi)TG含量顯著升高[(1.258±0.1038)mg/dlvs(5.513±0.2612)mg/dl,P<0.001)。
3、r> (2)造模成功后,予OEA及非諾貝特干預4、8h,實時定量PCR結果顯示:該兩種藥物在4h時對LPL mRNA及SCD-1mRNA調控比較明顯,與對照組相比,50μM OEA處理組LPL mRNA表達明顯升高(0.00083±0.00044vs0.00409±0.00018,P<0.001),而50μM非諾貝特組無明顯變化;50μM OEA及50μM非諾貝特處理組SCD-1mRNA表達均較對照組低(43.94±1.312、5
4、1.69±0.725vs62.62±2.085,P均<0.01)。該兩種藥物在8h對SREBP-1c mRNA及ACC mRNA調控比較明顯,與對照組相比,50μM OEA組SREBP-1c mRNA表達明顯降低(2.268±0.1487vs0.704±0.0747,P<0.001),而50μM非諾貝特對SREBP-1c基因表達無影響;50μM OEA及50μM非諾貝特處理組ACC mRNA表達均較對照組低(1.765±0.5009、3
5、.034±0.2839vs4.662±0.08452,P均<0.01);
(3)分別用10μM、50μM OEA及50μM 非諾貝特干預NAFLD細胞模型12h后,均可不同程度減少細胞內(nèi)蓄積的脂滴,其中50μM OEA效果最明顯。各處理組細胞內(nèi)TG含量較模型組均顯著下降:[(4.239±0.1273)mg/d、(3.343±0.2395)mg/dl、(3.467±0.244)mg/dlvs(5.181±0.2512)mg/
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