特異性COX-2抑制劑塞來(lái)昔布預(yù)防MNNG誘導(dǎo)的大鼠胃癌形成及其機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、該研究分二部分:1、探討特異性COX-2抑制劑Celecoxib和非特異性COX-2抑制劑消炎痛對(duì)化學(xué)致癌劑MNNG誘導(dǎo)的大鼠胃癌發(fā)生的影響.2、探討特異性COX-2抑制劑Celecoxib預(yù)防胃癌發(fā)生的可能作用機(jī)制.第一部分目的:探討特異性COX-2抑制劑Celecoxib和非特異性COX-2抑制劑消炎痛對(duì)化學(xué)致癌劑MNNG(N-甲基-N'-硝基-亞硝基胍,MNNG)誘導(dǎo)的大鼠胃癌發(fā)生的影響.方法:86只二級(jí)雄性Wistar大鼠,4周

2、齡,體重40-70克,隨機(jī)分為A、B、C、D、E、F共6組.A組(5只):自由飲用蒸餾水不作特殊處理;B組(16只):飲用含MNNG 100μg/ml的蒸餾水;C組(16只)、D組(17只)、E組(16只)和F組(16只)動(dòng)物除飲用MNNG 100μg/ml的蒸餾水外,C組動(dòng)物還灌喂消炎痛3mg/kg,1次/日,D組、E組和F組動(dòng)物分別灌喂Celecoxib 5mg/kg、Celecoxib10mg/kg和Celecoxib 20mg/

3、kg,1次/日;實(shí)驗(yàn)頭6周,B、C、D、E和F組動(dòng)物每周給予10％氯化鈉1ml灌胃,以提高誘癌率.以上處理連續(xù)10個(gè)月.處理因素結(jié)束后2個(gè)月處死動(dòng)物,觀察、比較各組動(dòng)物大體及組織學(xué)變化.結(jié)論:該研究提示特異性COX-2抑制劑Celecoxib對(duì)MNNG誘導(dǎo)的大鼠腺胃癌有預(yù)防作用,而非特異性COX-2抑制劑消炎痛未見(jiàn)此效果.第二部分目的:探討特異性COX-2抑制劑Celecoxib預(yù)防胃癌發(fā)生的作用機(jī)制.方法:研究標(biāo)本來(lái)源于第一部分研究動(dòng)

4、物,乙醚麻醉處死動(dòng)物,胃沿大彎切開(kāi),沿長(zhǎng)軸等分為5等份.胃腫瘤組織(T),癌旁組織(NT),處理組中未發(fā)生腫瘤的大鼠胃組織(N)以及正常對(duì)照組大鼠胃組織(C)被收集,每組標(biāo)本分割后分別投入液氮或固定于10%中性福爾馬林,用于檢測(cè)下列分子生物學(xué)和組織學(xué)指標(biāo).1.免疫組化方法檢測(cè)胃粘膜COX-1、COX-2蛋白的表達(dá);2.Real time PCR法檢測(cè)胃粘膜COX-1、COX-2 mRNA的表達(dá);3.PGE2含量的測(cè)定采用ELASE法;4

5、.采用HE染色凋亡細(xì)胞計(jì)數(shù)和TUNEL法檢測(cè)胃黏膜上皮細(xì)胞凋亡;5.Ki67免疫組化法檢測(cè)胃黏膜上皮細(xì)胞增殖情況;6.免疫組化和Real time PCR法檢測(cè)腫瘤組織血管上皮生長(zhǎng)因子VEGF的表達(dá);7.免疫組化和Real time PCR法檢測(cè)凋亡相關(guān)基因Bcl-2、Bax、Fas表達(dá)水平;比較各組動(dòng)物胃癌組織、癌旁組織、處理組中未見(jiàn)腫瘤的大鼠胃組織以及正常對(duì)照組大鼠胃組織上述各項(xiàng)指標(biāo)的差異.結(jié)論:Celecoxib預(yù)防胃癌的作用主要