COX-2選擇性抑制劑塞來昔布對人子宮內(nèi)膜腺癌抑制作用的研究.pdf

1、目的：探討COX-2選擇性抑制劑塞來昔布對人子宮內(nèi)膜腺癌的體外及體內(nèi)抑制作用及其相關(guān)機制，為治療子宮內(nèi)膜腺癌提供實驗依據(jù)。 方法： 一．體外試驗 以不同濃度的塞來昔布（25-200umol/L）分別以不同時間處理體外培養(yǎng)的HEC-1B細胞，用MTT法檢測細胞增殖，用流式細胞術(shù)檢測細胞周期和凋亡，用透射電鏡觀察細胞超微結(jié)構(gòu)的改變，用Transwell小室測定細胞侵襲力，用RT-PCR檢測COX-2 mRNA的表達。

2、 二．體內(nèi)試驗 1．30只裸鼠皮下注射HEC-1B細胞，建立人子宮內(nèi)膜癌裸鼠荷瘤模型。待成瘤后，裸鼠隨機分為對照組與實驗組，對照組予生理鹽水口服2周,實驗組分別予塞來昔布4mg/d和2mg/d口服2周。 2．從治療開始每3天計算瘤體積一次，描繪腫瘤生長曲線；治療結(jié)束后處死裸鼠，剝出瘤組織稱重，計算抑瘤率，瘤組織標本分別用RT-PCR檢測COX-2 mRNA的表達,用免疫組化法檢測COX-2蛋白的表達和微血管密度（

3、MVD）。 結(jié)果： 1．MTT結(jié)果顯示塞來昔布對HEC-1B細胞的增殖具有抑制作用，且呈現(xiàn)時間和濃度依賴性；流式細胞術(shù)結(jié)果顯示塞來昔布能使HEC-1B細胞G0/G1期細胞比例增加，S期和G2/M期細胞比例減少，細胞的凋亡率增加，與對照組相比差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；透射電鏡結(jié)果發(fā)現(xiàn)塞來昔布能使細胞出現(xiàn)凋亡的特征性改變，低濃度處理的細胞呈現(xiàn)空泡化的早期凋亡改變，高濃度則出現(xiàn)晚期凋亡的凋亡小體；隨著塞來昔布濃度的增加

4、（50-200umol/L），Transwell侵襲試驗結(jié)果表明細胞穿膜數(shù)目逐漸減少， RT-PCR結(jié)果顯示COX-2 mRNA的表達逐漸減弱，與對照組相比均有顯著差異（P<0.05）。 2．塞來昔布對裸鼠皮下移植瘤的生長具有明顯的抑制作用，且隨著藥物濃度的增加，抑瘤作用逐漸增強（抑瘤率分別為32.4％和48.6％）。同時隨著藥物濃度的增加，RT-PCR結(jié)果顯示移植瘤組織COX-2mRNA的表達逐漸減弱，免疫組化結(jié)果顯示移植瘤組