特異性環(huán)氧化酶-2抑制劑塞萊西布體外誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡及其化療協(xié)同作用.pdf

1、目的:該研究旨在研究特異性環(huán)氧化酶-2的抑制劑--塞萊西布在體外對(duì)人類肝癌、胃癌細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制、促凋亡作用,以及與化療藥物協(xié)同殺傷肝癌細(xì)胞的作用.通過(guò)觀察其在不同濃度時(shí)抑制肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)及促凋亡作用,以及協(xié)同不同化療藥物的殺傷作用,初步探討了該現(xiàn)象背后的可能機(jī)制,為臨床應(yīng)用打下基礎(chǔ).方法:1通過(guò)計(jì)數(shù)法測(cè)定肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線,獲得該細(xì)胞系基本生長(zhǎng)特性;2肝癌及胃癌細(xì)胞用含不同濃度(0,20,40,80,160和320 μ mol/L)的塞萊

2、西布的培養(yǎng)基培養(yǎng),24小時(shí)后應(yīng)用MTT測(cè)定生長(zhǎng)抑制率,電鏡、流式細(xì)胞技術(shù)來(lái)觀察細(xì)胞凋亡情況;3肝癌細(xì)胞用含不同濃度的5-氟尿嘧啶(0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1、10、100、1000、10000μ g/m L)、阿霉素(0.02、0.039、0.078、0.156、0.313、0.625、1.25、2.5、5、10 μ g/m L)、順鉑(0.39、0.78、1.56、3.13、6.25、12.5、25

3、、50、100、200 μ g/m L)及塞萊西布(80 μ mol/L)的培養(yǎng)液培養(yǎng),應(yīng)用MTT來(lái)測(cè)定生長(zhǎng)抑制率,電鏡、流式細(xì)胞技術(shù)來(lái)觀察細(xì)胞凋亡情況;4肝癌細(xì)胞用含80 μmol/L塞萊西布的培養(yǎng)基培養(yǎng),分別用蘇木精-伊紅、Hoechst33258試劑以及免疫組化的方法染色.結(jié)論:1 塞萊西布對(duì)不同來(lái)源的腫瘤細(xì)胞均具有一定的生長(zhǎng)抑制作用及誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞出現(xiàn)凋亡的作用,這種作用不僅是劑量依賴性的并且還是異質(zhì)性的;2 塞萊西布可以協(xié)同化療