雷公藤內(nèi)酯醇對多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞周期與凋亡的影響及其機(jī)制的探討.pdf

1、目的：觀察雷公藤內(nèi)酯醇對多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞RPMI-8226增殖、周期和凋亡的影響，并探討其機(jī)制。
　　 方法：采用MTT比色法檢測RPMI-8226細(xì)胞的增殖活性，Annexin V-FITC/PI雙標(biāo)法檢測細(xì)胞凋亡，采用Hoechst33258染色法觀察細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)的改變，流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞周期的改變，RT-PCR檢測雷公藤內(nèi)酯醇對RPMI-8226細(xì)胞內(nèi)P21wap1/cip1和P27 kip1基因表達(dá)的影響，Wester

2、n blot法檢測雷公藤內(nèi)酯醇對RPMI-8226細(xì)胞內(nèi)P21wap1/cip1、P27 kip1、NF-κB/p65和IκBα蛋白表達(dá)的影響，免疫熒光共聚焦技術(shù)觀察雷公藤內(nèi)酯醇對RPMI-8226細(xì)胞內(nèi)NF-κB/p65和IκBα定位的影響。
　　 結(jié)果：(1)雷公藤內(nèi)酯醇以時(shí)間、劑量依賴方式抑制RPMI-8226細(xì)胞增殖，其36 h的IC50值為121.76±2.01nmol/L。(2)雷公藤內(nèi)酯醇以劑量依賴方式誘導(dǎo)RPMI

3、-8226細(xì)胞凋亡，且伴有典型的凋亡細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變。(3)雷公藤內(nèi)酯醇阻滯RPMI-8226細(xì)胞周期于G0/G1期。(4)雷公藤內(nèi)酯醇以劑量依賴方式上調(diào)RPMI-8226細(xì)胞內(nèi)周期調(diào)控蛋白P21wap1/cip和P27 kip1的表達(dá)水平。此外，IκBα的表達(dá)增加，而細(xì)胞核因子NF-κB/p65的表達(dá)減少。(5)雷公藤內(nèi)酯醇干預(yù)后IκBα在RPMI-8226細(xì)胞漿內(nèi)的表達(dá)增加，而NF-κB/p65在細(xì)胞核內(nèi)的表達(dá)減少。
　　 結(jié)