血管內(nèi)皮生長因子C基因應用的前期研究.pdf

1、山東大學博士學位論文血管內(nèi)皮生長因子C基因應用的前期研究姓名：高杰申請學位級別：博士專業(yè)：人體解剖學與組織胚胎學指導教師：劉執(zhí)玉2002.5.16出丕盔堂盟主蘭嬉絲噩一——腦血管系統(tǒng)疾病和有關腫瘤的基因治療研究中，并己取得顯著成果，某些發(fā)達國家己i 耖( ～期臨床實驗階段，而V E G F —c 基因的應用研究尚處于起步階段。f自1 9 9 9 年起，本課題組針對V E G F —C 在腫瘤淋巴轉(zhuǎn)移中的生物學功能及其應用等方面開始了?系

2、列的研究。為了探討V G E ／。C 存淋巴管乍成和調(diào)節(jié)淋巴管內(nèi)皮細胞過程中的作用機制，探索抑制腫瘤淋巴轉(zhuǎn)移的新方法，并進一步應用V E G F —c 基因治療某些淋巴管形成缺陷性疾病，我們設計并完成了三部分的系列實驗。第一部分：V E G F - C 在人乳腺癌細胞株中的表達| 方法：、I ．培養(yǎng)人乳腺癌細胞株M D A ．M B 一2 3 1 ( 低分化) 、M C F 一7 ( 高分化)和阿霉素耐藥株M C F 一7 ／A d r

3、 。2 ．應用免疫組織化學S A B C 方法檢測V E G F ．C 在七述三種細胞中的定位、定性表達。3 ．運用I P P 圖像分析系統(tǒng)對免疫組織化學檢測結(jié)果進行分析處理，以陰性對照組細胞的平均密度均數(shù)為測量下限，測量實驗組陽性細胞的平均密度，并求其均數(shù)，以衡量v E G F ．C 的定量表達情況。4 ．運用統(tǒng)計學t 檢驗方法，比較V E G F —C 在M D A —M B 一2 3 1 與M C F 一7 和M C F 一7 與

4、M C F ～7 ／A d r 中的表達量差異情況。結(jié)果：1 ．免疫組化檢測發(fā)現(xiàn)M D A ～i V l B 一2 3 1 、M C F 一7 和M C F 一7 ／A d r 三種細胞的細胞質(zhì)中均有V E G F —c 的陽性棕黃色顆粒，而陰性對照細胞的細胞質(zhì)中均無陽性顆粒。2 ．運用[ P P 圖像分析系統(tǒng)處理免疫組化染色結(jié)果發(fā)現(xiàn)：M D A - M B 一2 3 1 、M C F 一7 和M c F 一7 ／A d r 陰性對照細