血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子對(duì)外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞功能的影響.pdf_第1頁(yè)
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1、研究目的:觀察不同濃度血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)對(duì)體外培養(yǎng)人外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPC)生物學(xué)功能的影響，探討VEGF促進(jìn)EPCs分裂生長(zhǎng)的合適濃度。 研究方法:密度梯度離心法獲取人外周血單個(gè)核細(xì)胞(MNCs)，接種至人纖維連接蛋白(humanfibronectin)包被的培養(yǎng)板上，培養(yǎng)4天后收集貼壁細(xì)胞，換用配有不同濃度(對(duì)照組、10ng/ml、20ng/ml、50ng/ml)VEGF的培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)3天后進(jìn)行細(xì)胞免疫組化鑒定

2、EPC，采用MTT比色法、改良的Boyden小室和黏附能力測(cè)定實(shí)驗(yàn)，觀察EPCs的增殖、遷移和黏附能力。 結(jié)果:從人外周血能成功分離EPCs細(xì)胞，并能分化為血管內(nèi)皮細(xì)胞；從冠心病患者分離的EPCs增殖能力較非冠心病患者弱；VEGF在較低濃度(10ng/ml和20ng/ml)時(shí)即能顯著促進(jìn)EPCs生長(zhǎng)的各項(xiàng)生物學(xué)指標(biāo)，但高濃度(50ng/ml)時(shí)并不能進(jìn)一步增強(qiáng)這一效應(yīng)；低濃度(10ng/ml)下VEGF對(duì)冠心病患者作用較非冠心病

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