血管內皮生長因子對心肺發(fā)育影響的實驗研究.pdf

1、第一部分血管內皮生長因子對肺表面活性物質磷脂合成的影響 目的：研究血管內皮生長因子(vascularendothelialgrowthfactorVEGF)對肺表面活性物質合成、分泌的影響，探討防治早產兒呼吸窘迫綜合征(RDS)的新途徑。方法：孕19天Wistar大鼠剖腹取胎鼠，原代培養(yǎng)肺泡Ⅱ型細胞，分成VEGF組、地塞米松組、VEGF加地塞米松組和對照組進行試驗，測定肺表面活性物質總磷脂、磷脂酰膽堿(PC)、磷脂酰甘油(PG)

2、、鞘磷脂(SM)含量。結果：VEGF組、地塞米松組與VEGF加地塞米松聯(lián)合應用組總磷脂含量較對照組均顯著增加，聯(lián)合應用組總磷脂增加最明顯。VEGF組、地塞米松組和聯(lián)合應用組均能使PC、SM增高，VEGF對PC、SM作用更明顯。VEGF和聯(lián)合應用組尚可增加PG含量，而地塞米松對PG的合成無明顯作用。結論：VEGF比地塞米松能更有效地刺激早產鼠肺泡Ⅱ型細胞合成和分泌肺表面活性物質磷脂，它與地塞米松具有協(xié)同作用，可使肺表面活性物質磷脂進一步增

3、加。VEGF可能通過促進肺泡Ⅱ型細胞的發(fā)育，增加肺表面活性物質磷脂的合成，從而改善早產兒肺功能，防止早產兒RDS的發(fā)生。 第二部分血管內皮生長因子對肺泡Ⅱ型細胞相關受體的影響 目的：研究血管內皮生長因子(VEGF)對肺泡表面活性物質結合蛋白B(SP-BsurfactantproteinB)、肺泡Ⅱ型細胞VEGF及其受體Flt-1、Flk-1表達的影響，探討其聯(lián)合使用地塞米松的作用。方法：孕19天Wistar大鼠剖腹取胎鼠

4、，原代培養(yǎng)肺泡Ⅱ型細胞，分成VEGF組、地塞米松組、VEGF加地塞米松組和對照組進行試驗，測定肺泡Ⅱ型細胞VEGF及其受體Flt-1、Flk-1和SP-B表達。結果：VEGF組、地塞米松組與VEGF加地塞米松組SP-B陽性表達，對照組陰性表達；VEGF組與VEGF加地塞米松組VEGF、Flt-1、Flk-1陽性表達，地塞米松組VEGF、Flt-1、Flk-1陰性表達。結論：VEGF能促進肺泡發(fā)育和肺表面活性物質結合蛋白B的合成、分泌，拮

5、抗地塞米松下調肺泡Ⅱ型細胞受體的表達。但是否能減輕孕婦使用地塞米松引起的胎兒肺與體重的比值下降，次級肺泡隔形成減少等副作用，尚待進一步研究。 第三部分：血管內皮生長因子與地塞米松對早產鼠肺發(fā)育影響的實驗研究 目的：動物實驗研究血管內皮生長因子(VEGF)以及地塞米松單獨或聯(lián)合應用對早產大鼠肺表面活性物質、肺泡表面活性物質結合蛋白BmRNA(SP-BmRNA)表達的影響，探討血管內皮生長因子(VEGF)以及地塞米松單獨或聯(lián)

6、合應用與肺發(fā)育的關系，為臨床防治早產兒呼吸窘迫綜合征(RDS)提供新途徑。方法：孕15d清潔級Wistar大鼠12只，隨機分為4組，每組平均3只，試驗分組：VEGF-165組、地塞米松組、VEGF加地塞米松組和對照組進行試驗，應用薄層層析法測定肺組織中肺泡表面活性物質總磷脂、磷脂酰膽堿(PC)、磷脂酰甘油(PG)、鞘磷脂(SM)含量。同時應用RT-PCR檢測早產鼠肺組織中肺泡表面活性物質結合蛋白B(SP-BmRNA)的表達。結果：VEG

7、F-165組、地塞米松組與VEGF加地塞米松聯(lián)合應用組肺組織中總磷脂含量增加，其中聯(lián)合應用組總磷脂含量最高。VEGF組與對照組比較PC、PG含量有顯著性差異，SM含量無顯著性差異。地塞米松組與對照組比較PC、SM含量有顯著性差異，PG含量無顯著性差異。地塞米松組與VEGF加地塞米松組肺組織中SP-BmRNA表達與對照組比較，p＜0.05，差異有顯著性，VEGF組與對照組比較，p＞0.05，差異無顯著性。結論：VEGF-165能促進肺表面

8、活性物質的合成和分泌，VEGF、地塞米松對肺泡磷脂各成分及蛋白的影響各不相同，兩者具有協(xié)同作用。它們可能通過不同的機制，增加了肺泡表面活性物質的合成和分泌，同時在分子水平上促進肺表面活性蛋白的分泌與合成，改善了肺功能，有利于防止因肺表面活性物質缺乏所致的早產兒RDS的發(fā)生。 第四部分血管內皮生長因子與維生素A對胎兔動脈導管和肺發(fā)育的影響 目的：血管內皮生長因子(VEGF)與維生素A(VitA)對胎兔動脈導管和肺發(fā)育的影響

9、，為防治早產兒動脈導管未閉尋找新的途徑。方法：8只孕兔隨機分為4組，VEGF組、VitA組、生理鹽水對照組，每組各2只：分別在受孕第25天給予VEGF0.1μg/kg，第25和26兩天連續(xù)運用3000IU/kgVitA，第25和26兩天連續(xù)運用生理鹽水1ml/kg。于孕第27天內(早產期內)解剖孕兔，取胎兔的肺組織、動脈導管和及肝兔的羊水。羊水做羊水板層小體測定，肺組織固定后HE染色了解肺的發(fā)育情況，部分動脈導管固定后HE染色了解內膜增