革皮氏海參(Pearsonothria graeffei)總皂苷的安全性評(píng)價(jià).pdf

1、海參皂苷是海參的主要次生代謝產(chǎn)物，具有抗腫瘤、抗菌、提高免疫力等多種生理和藥理學(xué)活性，但同時(shí)也具有較強(qiáng)的溶血和肝臟、腎臟毒性等細(xì)胞毒性作用。目前已從海參體中分離鑒別出100多種海參皂苷單體。革皮氏海參(Pearsonothria graeffei, P.graeffei)是一種高皂苷含量的低值海參，因此，本文以革皮氏海參總皂苷為研究對(duì)象，參照毒理學(xué)安全性評(píng)價(jià)的程序和方法，首先進(jìn)行急性毒性實(shí)驗(yàn)確定了海參皂苷的半數(shù)致死劑量（median l

2、ethal dose，LD50）和毒性級(jí)別，在此基礎(chǔ)上對(duì)海參皂苷的遺傳毒性、亞急性、致畸性和亞慢性毒性進(jìn)行了系統(tǒng)的評(píng)價(jià)和研究。主要研究結(jié)果如下：
　　急性毒性實(shí)驗(yàn)，通過一次性給予大鼠不同劑量的海參皂苷，在給藥后14d內(nèi)觀察大鼠中毒及死亡情況。計(jì)算得出，革皮氏海參總皂苷對(duì)雌、雄大鼠的LD50分別為0.797g/kg和0.818g/kg，屬低毒級(jí)；對(duì)大鼠外周血象和血液生化指標(biāo)無顯著性影響。
　　在LD50的基礎(chǔ)上進(jìn)行了遺傳毒性實(shí)

3、驗(yàn)的研究，包括Ames實(shí)驗(yàn)、小鼠骨髓細(xì)胞微核實(shí)驗(yàn)和精子畸形實(shí)驗(yàn)。Ames實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陰性，說明革皮氏海參總皂苷無致突變作用。小鼠骨髓細(xì)胞微核實(shí)驗(yàn)中，通過觀察骨髓細(xì)胞涂片計(jì)算微核發(fā)生率，結(jié)果顯示海參皂苷劑量組與正常組相比骨髓細(xì)胞微核率無顯著性差異，提示灌胃135~540mg/kg（1/8~1/2 LD50）海參皂苷對(duì)骨髓細(xì)胞無遺傳毒性作用。小鼠精子畸形實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，高劑量組海參皂苷精子畸形率與正常組相比顯著性升高，提示540mg/kg（1/

4、2 LD50）海參皂苷對(duì)雄性生殖細(xì)胞具有遺傳毒性作用。
　　傳統(tǒng)致畸實(shí)驗(yàn)是在大鼠懷孕期間給予不同劑量的海參皂苷，記錄大鼠在孕期的體重變化情況，于妊娠第20d處死孕鼠，記錄總胎數(shù)、活胎數(shù)、死胎數(shù)和吸收胎數(shù)；稱子宮重、胎盤重和胎鼠重；測(cè)量胎鼠體長(zhǎng)和尾長(zhǎng)；檢查胎鼠的外觀、內(nèi)臟和骨骼。結(jié)果表明革皮氏海參總皂苷對(duì)孕鼠生長(zhǎng)、胚胎形成和發(fā)育、胎鼠外觀、內(nèi)臟和骨骼均未產(chǎn)生顯著性影響，提示海參皂苷在12.3~192.5mg/kg（1/64~1/4

5、LD50）范圍內(nèi)無胚胎毒性和致畸性。
　　對(duì)于亞急性和亞慢性毒性實(shí)驗(yàn)，是連續(xù)30d和90d灌胃不同劑量的海參皂苷，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后對(duì)大鼠進(jìn)行血象和血液生化指標(biāo)及組織病理學(xué)檢查。結(jié)果表明海參皂苷各劑量組與正常組相比在體重、血象和血液生化各指標(biāo)均無顯著性差異，提示革皮氏海參總皂苷對(duì)大鼠生長(zhǎng)發(fā)育、血象、肝功、腎功、心肌損傷均無毒性作用。30d喂養(yǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果初步表明，灌胃高劑量100mg/kg（12.8％LD50）海參皂苷的大鼠睪丸形態(tài)發(fā)生顯著性

6、變化，生精細(xì)胞層次減少、退化，提示100mg/kg（12.8%LD50）海參皂苷對(duì)雄性大鼠具有一定的亞急性毒性作用；90d喂養(yǎng)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證明了100mg/kg海參皂苷對(duì)雄性大鼠具有亞慢性毒性作用，毒性作用靶器官是睪丸。
　　本文首次對(duì)革皮氏海參總皂苷進(jìn)行了比較系統(tǒng)全面的毒理學(xué)安全性評(píng)價(jià)，闡明了海參皂苷的毒性作用特點(diǎn)、毒作用靶器官和安全限量范圍。綜上所述，海參皂苷在50mg/kg·bw以下的使用范圍內(nèi)對(duì)大鼠無毒性作用，換算成人體劑量