消異方對大鼠異位子宮內(nèi)膜VEGF及凋亡機(jī)制的影響.pdf

1、目的：觀察消異方對子宮內(nèi)膜異位癥大鼠異位內(nèi)膜組織形態(tài)學(xué)、VEGF、survivin、Caspase3和細(xì)胞凋亡傾向的影響，探討消異方治療子宮內(nèi)膜異位癥的作用機(jī)制，為其臨床應(yīng)用提供重要依據(jù)。
　　 方法：選用3月齡的SD雌性大鼠80只，體重200±20g／只，適應(yīng)性喂養(yǎng)7天。7天后起每日晨7點(diǎn)鏡下觀察其陰道涂片，建立其動情周期檔案。對動情期大鼠進(jìn)行自體移植法手術(shù)造模，造模后4周，剖腹探查異位內(nèi)膜存活與否。選擇造模成功的大鼠隨機(jī)分為

2、8組進(jìn)入實(shí)驗(yàn)，按以下方案給藥：（1）空白對照組：自由飲食、飲水。（2）假手術(shù)組：生理鹽水，1ml/100g灌胃。（3）模型組：生理鹽水，1ml/100g灌胃。（4）散結(jié)鎮(zhèn)痛膠囊組：散結(jié)鎮(zhèn)痛膠囊混懸液，含生藥0.05g/ml,按1ml/l00g灌胃。（5）米非司酮組：米非司酮混懸液，含生藥2mg/ml，按1ml/l00g灌胃。（6）中藥低劑量組：含生藥1.125g/ml，按1ml/l00g灌胃。（7）中藥中劑量組：含生藥2.25g/ml，

3、按1ml/l00g灌胃。（8）中藥高劑量組：含生藥4.5g/ml，按1ml/l00g灌胃。上述給藥方法均采用1次/d，連續(xù)灌胃28天。于末次給藥后24小時(shí)，10％水合氯醛(0.3ml/100 g)腹腔過量麻醉處死，取出正常子宮和異位內(nèi)膜組織，甲醛固定，石蠟包埋切片（5um），分4組，分別用于免疫組化VEGF、survivin、Caspase3的檢測和細(xì)胞凋亡TUNEL檢測。
　　 結(jié)果：1.造模大鼠異位內(nèi)膜肉眼觀體積較大，米非司

4、酮組、散結(jié)鎮(zhèn)痛膠囊組、中藥低劑量組、中藥中劑量組、中藥高劑量組，與模型組比較出異位內(nèi)膜體積明顯縮小。2.消異方各組異位內(nèi)膜的血管內(nèi)皮生長因子VEGF的表達(dá)比模型組顯著性降低(P<0.05)。3.消異方各組異位內(nèi)膜的凋亡抑制基因survivin表達(dá)比模型組顯著性降低(P<0.05)。4.消異方各組異位內(nèi)膜的Caspase3表達(dá)比模型組顯著性提高(P<0.05)。5.消異方各組異位內(nèi)膜細(xì)胞凋亡率均高于模型組,有顯著性差異(P<0.05)。<

5、br>　　 結(jié)論：1.消異方能夠抑制異位子宮內(nèi)膜生長，且消異方高劑量組效果最明顯。2.消異方能夠抑制異位子宮內(nèi)膜合成和分泌VEGF的能力，從而抑制子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生。3.消異方通過激活細(xì)胞中的Caspase酶原活性，進(jìn)而誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡，促使異位內(nèi)膜壞死脫落。4.消異方通過降低survivin 在EM中的高表達(dá)，使凋亡通路下游的Caspase3,7發(fā)揮抗凋亡作用直接減弱，從而抑制了異位內(nèi)膜的增長。5.通過細(xì)胞凋亡TUNEL法檢測，了