CO2氣體對SCID鼠異位子宮內(nèi)膜細胞凋亡的影響及其意義.pdf

1、子宮內(nèi)膜異位癥(Endometrosis,Ems)是指有活力的子宮內(nèi)膜組織(腺體和間質(zhì))在子宮腔及子宮肌層以外部分生長,引起癥狀,是育齡婦女的一種常見病,其患病率約10％,有逐年上升趨勢,主要引起不孕、痛經(jīng)、慢性盆腔痛等癥狀,嚴重影響患者生活質(zhì)量.自1921年Sampson教授首次描述該病以來,至今其病因仍然不是很清楚。近年來Ems與細胞凋亡的關系日益受到重視,細胞凋亡通過消減分泌晚期和月經(jīng)期功能層失活細胞從而維持子宮內(nèi)膜月經(jīng)周期細胞的

2、穩(wěn)態(tài).越來越多研究表明,在位內(nèi)膜細胞和異位內(nèi)膜細胞自發(fā)性凋亡的下降可能促進了Ems的發(fā)生和發(fā)展。
　　 腹腔鏡手術比開腹手術具有創(chuàng)傷小、腹部疤痕小,術后恢復快,粘連輕,住院時間短等優(yōu)點,是Ems診斷和治療的首選方式.但是Ems患者腹腔鏡手術術后復發(fā)問題一直困擾著婦產(chǎn)科醫(yī)生,同時也吸引了越來越多學者的關注。迄今國內(nèi)尚未見腹腔鏡CO2氣腹本身對Ems腹腔鏡手術術后復發(fā)的影響及病理生理改變的報道。
　　 目的;
　　

3、本課題結(jié)合細胞凋亡在Ems發(fā)生、發(fā)展中的作用和CO2氣腹引起腫瘤轉(zhuǎn)移的最新進展,通過構(gòu)建SCID小鼠內(nèi)異癥和氣腹模型,旨在探索CO2氣體是否抑制了異位子宮內(nèi)膜細胞的凋亡從而影響子宮內(nèi)膜異位癥患者腹腔鏡手術術后復發(fā)和轉(zhuǎn)移。
　　 材料和方法
　　 選擇浙江大學醫(yī)學院附屬婦產(chǎn)科醫(yī)院患子宮肌瘤行子宮切除患者的增生期子官內(nèi)膜,雙側(cè)腹壁縫合法構(gòu)建SCID鼠子宮內(nèi)膜異位癥模型(n=60),然后構(gòu)建SCID鼠CO2氣腹模型(n=60)

4、,壓力維持在5mmHg,時間分別為60min和120min,實驗設置對照組.最后用Tunel法檢測SCID鼠異位子宮內(nèi)膜細胞的凋亡指數(shù)。
　　 所有實驗數(shù)據(jù)用SPSS16.0統(tǒng)計軟件包進行處理。計量數(shù)據(jù)結(jié)果由均值士標準差(X-±S)表示;組間結(jié)果比較用方差分析,配對t檢驗.以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　 結(jié)果
　　 1.SCID鼠子宮內(nèi)膜異位癥模型總成模率61.67％(37/60).內(nèi)異囊腫直徑0.2c

5、m-1.0cm不等,外觀呈透明狀或新鮮亮白色,內(nèi)有囊液,囊壁表面覆蓋有毛細血管,腹腔少量粘連。HE染色證實為子宮內(nèi)膜組織,有腺上皮和間質(zhì)細胞。
　　 2.SCID鼠CO2氣腹模型成功率86.49％(32/37)。
　　 3.細胞凋亡檢測結(jié)果(1)實驗組和對照組均可見到明顯的凋亡細胞(腺上皮細胞和間質(zhì)細胞),凋亡細胞熒光顯微鏡下可見到其染色質(zhì)濃縮、邊緣化,核膜裂解、染色質(zhì)分割成塊狀和凋亡小體等典型的凋亡形態(tài)。蘇木素復染后,

6、光鏡下腺上皮和間質(zhì)凋亡細胞被染成深棕色。
　　 (2)實驗組和對照組中腺上皮細胞隨時間延長凋亡指數(shù)呈下降趨勢,并且氣腹時間越長凋亡指數(shù)下降越明顯,其中F組(120min,2個月)與B組(免氣腹,2個月)相比差異有顯著意義(P＜0.05)、F組(120min,2個月)與D組(60min,2個月)相比差異有顯著意義(P＜0.05),F組(120min,2個月)與E組(120min,1個月)相比差異有統(tǒng)計意義(P＜0.05),其他各組

7、間差異無顯著意義(P＞0.05)。
　　 (3)實驗組和對照組間質(zhì)細胞與同組腺上皮細胞相比凋亡指數(shù)略低,但差異無顯著意義(P＞0.05).與免氣腹組相比氣腹各組間質(zhì)細胞凋亡指數(shù)均呈下降趨勢,但差異無顯著意義(P＞0.05),并且充氣時間越長凋亡指數(shù)下降更明顯,但差異無顯著意義(P＞0.05).
　　 結(jié)論
　　 1.腹壁縫合法構(gòu)建SCID鼠子宮內(nèi)膜異位癥動物模型,成模率較高,觀察時限長、定位準確、易于觀察、重復性