番茄SlEIL對乙烯合成的轉錄調控.pdf

1、以模式植物番茄（Solanum lycopersicum Mill.）為試材，研究了果實成熟衰老相關變化，采用基因表達、基因互作等技術，結合轉基因材料，探索了乙烯信號轉導途徑轉錄因子SlEIL反饋調控SlACS與SlACO，進而調節(jié)乙烯合成的機制，主要結果如下:
　　1、研究了SlACS和SlACO基因的組織特異性。SlACS基因的組織特異性表達顯示，SlACS2和SlACS4主要在番茄果肉中表達，SlACS1、SlACS3和Sl

2、ACS8在花中的表達量較高，SlACS5在莖中表達最強但在果肉組織中的表達低于檢測限（果實成熟進程研究不做為研究對象），而SlACS6與SlACS7在不同組織中的表達量相差不大。SlACO基因在不同組織中廣泛表達，SlACO1在果實中的表達量明顯高于其他組織，SlACO2、SlACO3和SlACO4均在花中表達最強，SlACO5則在葉片中表達最高，而SlACO6除在莖中表達量較低以外，其余三種組織相差不大。
　　2、開展了SlEI

3、L、SlACS和SlACO基因在番茄果實不同成熟階段的表達模式研究。對4個不同成熟期果實，即綠熟(MG)，破白(BR)，粉紅(PK)，紅熟（RR）的研究表明，伴隨著成熟，果實色澤指數(shù)和乙烯釋放量增加、硬度下降。SlACS基因家族各成員表達模式不盡相同，其中SlACS2和SlACS4表達隨果實成熟顯著上升，SlACS1、SlACS3、SlACS6和SlACS7的表達則相對穩(wěn)定，SlACS8至PK期表達量有所上升。SlACO基因家族各成員表

4、達結果表明，SlACO1、SlACO2和SlACO3表達隨果實成熟趨于上升，SlACO5則僅在紅熟果實中略有增強表達，SlACO6的表達呈BR期上升至RR下降的趨勢，而SlACO4則為組成型表達。4個SlEIL基因表達相對較穩(wěn)定，其中SlEIL1在BR期表達略有上升，SlEIL4伴隨著果實成熟略微上升。
　　3、研究了轉反義SlEIL1基因番茄材料(1AS-2)乙烯釋放量。利用外源乙烯(100μl/L，18h)處理播種后3周轉基因

5、實生苗顯示，轉基因1AS-2實生苗的乙烯釋放量明顯低于野生型的。進而分析比較了轉基因和野生型番茄果實乙烯釋放速率，發(fā)現(xiàn)BR和BR+7的轉基因和野生型番茄果實的乙烯釋放速率均無顯著差異。上述結果表明抑制SlEIL可導致轉基因1AS-2實生苗乙烯釋放受抑制，而在BR和BR+7果實中未發(fā)現(xiàn)此現(xiàn)象，需進一步探明其原因。利用轉基因和野生型實生苗，發(fā)現(xiàn)轉基因實生苗中4個SlEIL的表達都受到不同程度的抑制，同時SlACS1、SlACS3、SlACO

6、3、SlACO4和SlACO6的表達在1AS-2轉基因番茄的實生苗中受到抑制，這與乙烯釋放速率一致。SlACS7和SlACS8在轉基因實生苗中表達量甚至高于野生型，其余家族成員則無顯著差異。推測SlEIL受抑制的轉基因實生苗中乙烯釋放速率的下降可能與SlACS1、SlACS3、SlACO3、SlACO4和SlACO6相關。
　　4、研究了SlEIL對SlACS和SlACO基因啟動子的調控效應。利用分離得到的SlACS1、SlACS