牡蠣糖胺聚糖抗病毒作用的實驗研究.pdf

1、目的：觀察牡蠣糖胺聚糖(0-GAG)對單純皰疹病毒Ⅰ型(HSV-Ⅰ)的抑制作用以及對免疫功能的影響，初步探討牡蠣糖胺聚糖(0-GAG)的抗病毒作用機理。 方法：1、以非洲綠猴腎細胞(Vero細胞)為宿主細胞，采用體外細胞培養(yǎng)技術，通過細胞病變法(CPE)和MTT比色法，觀察不同濃度0-GAG體外給藥對單純皰疹病毒Ⅰ型(HSV-ⅠSM44株)的直接殺傷作用、對病毒復制的抑制作用以及對HSV-Ⅰ感染細胞的綜合作用等。采用體外細胞培養(yǎng)

2、技術，觀察0-GAG體外給藥在50-1600μg/ml濃度范圍內(nèi)對Vero細胞的毒性作用。 2、利用小鼠建立HSV-Ⅰ病毒感染的動物模型，通過觀察不同濃度0-GAG經(jīng)注射給藥后對病毒感染小鼠的體重變化、平均存活時間和生命延長率、死亡率的影響。采用病理組織學方法，觀察0-GAG經(jīng)注射給藥后對病毒感染小鼠的心、腦、肝、脾、腎、肺等重要臟器形態(tài)學的影響。 3、采用HSV-Ⅰ病毒感染的小鼠模型，觀察不同濃度0-GAG注射給藥后，

3、病毒感染小鼠的胸腺指數(shù)和脾指數(shù)的變化；采用巨噬細胞吞噬中性紅試驗，觀察不同濃度0-GAG對病毒感染小鼠腹腔巨噬細胞(PMφ)吞噬能力的影響；采用MTT法，觀察不同濃度0-GAG對病毒感染小鼠對脾淋巴細胞轉化增殖的影響，以分析O-GAG對病毒感染動物免疫功能的作用。 結果：1、在體外實驗中顯示，0-GAG在50-1600μg/m1濃度范圍內(nèi)對Vero細胞無明顯毒性。與病毒對照組相比，0-GAG各濃度(100μg/ml、50μg/m

4、l、25μg/ml)能保護HSV-Ⅰ感染的Vero細胞，使細胞增值活性增強，減弱HSV-Ⅰ導致的病變效應，抑制病毒的復制(P<0.01)，但是0-GAG體外給藥對HSV-Ⅰ沒有直接殺傷作用(P>0.05)。 2、HSV-Ⅰ感染小鼠在注射不同劑量的0-GAG(10mg、20mg、40mg/kg)后，其體重增加，平均存活時間延長，死亡率降低，與病毒組差異有顯著性意義(P<0.05)； O-GAG(10mg、20mg、40mg

5、/kg)對HSV-I感染小鼠的內(nèi)臟器官有一定的保護作用，能減輕組織的病理改變。 3、與病毒對照組相比，O-GAG(10mg、20mg、40mg/kg)均能顯著提高病毒感染小鼠的胸腺指數(shù)和脾指數(shù)(P<0.05，P<0.01)；與病毒組比較，O-GAG能夠增強病毒感染小鼠巨噬細胞的吞噬能力；促進脾淋巴細胞轉化增殖(P<0.05，P<0.01)。 結論：O-GAG在體外具有一定的抗單純皰疹病毒I型的作用，對HSV-I感染的小鼠有治療作