Spred2調(diào)節(jié)肝癌細(xì)胞生物學(xué)特性及機(jī)制研究.pdf

1、Spreds(Sprouty related with EVH1 domain)是近年發(fā)現(xiàn)的一類與Sprouty相關(guān)的細(xì)胞膜蛋白。研究表明，在原發(fā)性肝細(xì)胞癌患者，Spred1與Spred2表達(dá)水平降低，而且，Spreds水平的降低是獲得惡性表征的重要原因；此外，水飛薊賓處理能提高HepG2細(xì)胞Spred1與Spred2表達(dá)水平。上述研究結(jié)果提示，Spreds表達(dá)的下調(diào)可能是腫瘤形成的原因之一。為此，我們擬以肝癌細(xì)胞SMMC-7721為模

2、型，就Spred2對(duì)其生物學(xué)特性的影響及其相關(guān)機(jī)制展開(kāi)初步研究。深入研究Spreds分子的作用，無(wú)疑將為肝癌的基因治療提供更有效的新策略，發(fā)掘更多的新靶標(biāo)。
　　 首先，本研究用攜帶Spred2的重組腺病毒感染SMMC-7721細(xì)胞，建立了過(guò)表達(dá)Spred2的細(xì)胞模型。觀察了過(guò)表達(dá)Spred2對(duì)SMMC-7721細(xì)胞增殖，遷移和凋亡的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，過(guò)表達(dá)Spred2能抑制SMMC-7721增殖和遷移并誘導(dǎo)SMMC-7721凋亡

3、。接著，初步探討了Spred2調(diào)控SMMC-7721細(xì)胞生物學(xué)功能的分子機(jī)制。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，過(guò)表達(dá)Spred2下調(diào)了ERK和Mcl-1分子的表達(dá)水平，誘導(dǎo)SMMC-7721細(xì)胞凋亡是通過(guò)部分激活Caspase3活性來(lái)實(shí)現(xiàn)的。為進(jìn)一步證實(shí)Spred2的抑癌作用，本實(shí)驗(yàn)以裸鼠為模型，觀察了過(guò)表達(dá)及干涉Spred2的肝癌細(xì)胞在裸鼠體內(nèi)的成瘤特性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與細(xì)胞實(shí)驗(yàn)不同，過(guò)表達(dá)Spred2并未抑制腫瘤生長(zhǎng)，而干涉Spred2卻能明顯地促進(jìn)腫瘤的生