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文檔簡介
1、大環(huán)內(nèi)酯類藥物是一類廣泛使用的藥物,可分為大環(huán)內(nèi)酯類抗生素和大環(huán)內(nèi)酯抗寄生蟲(阿維菌素類)兩類。大環(huán)內(nèi)酯抗生素在獸醫(yī)上廣泛用于治療牛、羊、豬、禽的呼吸道疾病和腸道細(xì)菌感染,也用于飼料添加劑以促進(jìn)動物生長。大環(huán)內(nèi)酯抗寄生蟲已經(jīng)在世界范圍內(nèi)用于保障人、動物和植物的健康,它可以殺滅寄生蟲,如蛔蟲、肺蟲和螨蟲等。
在獸醫(yī)治療上,抗生素聯(lián)合用藥非常普遍。聯(lián)合用藥可以帶來單獨(dú)使用所沒有的效果,林可霉素、壯觀霉素復(fù)方制劑(比率1∶2)就
2、是其中一例。壯觀霉素、林可霉素兩者聯(lián)合使用具協(xié)同作用,常用于治療生長期家禽的慢性呼吸道疾病、支原體肺炎和腹瀉等。
這些抗生素藥物的不正確使用會在可食性組織中殘留,對消費(fèi)者產(chǎn)生毒性反應(yīng),如過敏人群會產(chǎn)生過敏反應(yīng),或誘導(dǎo)耐藥菌株產(chǎn)生而引起間接危害。阿維菌素類毒性低,但其在動物體內(nèi)殘留時間長,可能會對人體造成危害。關(guān)于這些藥物的多殘留方法,國內(nèi)外雖有報道,但目前還沒有不同種類藥物的多殘留方法,并且檢測種類也較少。因此本研究從建立
3、不同種類藥物的多殘留方法展開研究,建立了大環(huán)內(nèi)酯類抗生素和大環(huán)內(nèi)酯抗寄生蟲、林可胺和壯觀霉素兩個多殘留方法,以監(jiān)測這些藥物在動物可食性組織的殘留。
方法一是建立動物可食性組織中大環(huán)內(nèi)酯類藥物的HPLC-MS/MS法。組織樣品用甲醇/乙腈(1∶1)混合溶液提取,正己烷脫脂,40℃水浴下緩慢蒸干提取液。殘余物甲醇溶解,40℃水浴下氮?dú)饩徛蹈桑鲃酉?.5mL溶解,12,000rpm離心后取10μL進(jìn)樣。檢測采用選擇反應(yīng)監(jiān)測(
4、SRM)模式。結(jié)果表明,大環(huán)內(nèi)酯類在組織中的檢出限(CCα;α1%)在0.3μg/kg~1.5μg/kg之間,定量限(CCβ;β5%)在0.5μg/kg~2.5μg/kg之間。在不同加標(biāo)水平下,平均回收率在64.3%~88.0%之間,日間變異系數(shù)在4.6%~24.3%之間。
方法二是以固相萃取和衍生為基礎(chǔ),建立同時檢測豬、牛、雞可食性組織以及雞蛋和牛奶中林可霉素、壯觀霉素的氣相色譜分析法和林可霉素、克林霉素和壯觀霉素的氣質(zhì)
5、確證方法。組織樣品用磷酸緩沖液/三氯乙酸混合液提取,加入離子對試劑,供SPE凈化,甲醇洗脫,洗脫液40℃水浴氮?dú)獯蹈?。殘余物加乙腈和BSTFA于75℃反應(yīng)60min,用氮?dú)饩徛蹈?,正己烷定容,離心,取1μL上清液用氣相色譜和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用測定。
氣相色譜定量方法結(jié)果顯示,組織中林可霉素和壯觀霉素的最低檢測限分別是20μg/kg、30μg/kg,最低定量限分別是30μg/kg、40μg/kg。在四個加標(biāo)水平下,林可霉素
6、和壯觀霉素回收率介于70.6%~86.5%之間,日間變異系數(shù)≤12.6%。
確證方法以選擇離子監(jiān)測(SIM)為測定方法。林可霉素和克林霉素均以離子126為定量離子,壯觀霉素以145為定量離子。該條件下,林可霉素的最低檢測限和最低定量限分別是3μg/kg和5μg/kg,克林霉素的最低檢測限和最低定量限分別是15μg/kg和20μg/kg,壯觀霉素的最低檢測限和最低定量限分別是15μg/kg和20μg/kg。平均回收率介于68
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