動物性食品中大環(huán)內(nèi)酯類抗生素殘留的HPLC分析.pdf

1、大環(huán)內(nèi)酯類抗生素(macrolideantibiotics,MALs)是一類化學(xué)結(jié)構(gòu)和抗菌作用相近的堿性抗生素群，屬于中譜抗生素。MALs廣泛用于畜禽細(xì)菌性和支原體感染的化學(xué)治療，同時也是重要的生長促進(jìn)劑，在動物藥品和飼料添加物中占有重要位置。然而當(dāng)過量或不當(dāng)使用此類抗生素時，會造成獸藥殘留，MALs通過食物鏈進(jìn)入人體，將對人類健康構(gòu)成嚴(yán)重危害。MALs在動物性食品中的殘留檢測和監(jiān)控與其他獸藥一樣已受到許多國家包括我國政府的高度重視，目

2、前歐盟及我國均對MALs提出了限量要求。 本文以螺旋霉素(SPI)、吉他霉素(KIT)、替米卡星(TILM)、泰樂菌素(TYL)、紅霉素(ERM)、竹桃霉素(OLE)為目標(biāo)檢測物，針對目前肉類食品中大環(huán)內(nèi)酯類抗生素殘留檢測的研究現(xiàn)狀，從以下幾方面展開研究工作： 1)建立了一種反相高效液相色譜法對六種大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的分離檢測方法。通過考察色譜柱、柱溫、流動相組成等因素對六種大環(huán)內(nèi)酯的保留時間及分離的影響，優(yōu)化了各色譜條件

3、。此方法采用二極管陣列檢測器，分別在204nm，232nm，287nm波長下進(jìn)行檢測。SPI、KIT、TYL、TILM四種物質(zhì)的檢出限為0.016-0.041mg/kg，定量限0.053-0.135mg/kg，線性范圍較好，靈敏度高，結(jié)果可靠。 2)研究了基質(zhì)較復(fù)雜的肉類食品中大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的提取、凈化、富集等樣品處理方法。對提取溶劑、提取方法、固相萃取柱、淋洗液及洗脫液等條件進(jìn)行了研究優(yōu)化。最終選擇以甲醇為提取溶劑，用Bon

4、dElutSCX(500mg,3mL)固相萃取柱對提取液進(jìn)行凈化。豬肝、雞肉樣品處理后使用高效液相色譜檢測，對樣品的加標(biāo)回收實驗結(jié)果良好，并通過液相色譜-電噴霧質(zhì)譜進(jìn)行確證分析。 3)建立了高效液相色譜-電噴霧質(zhì)譜同時檢測肉類食品中六種大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的方法。以羅紅霉素為內(nèi)標(biāo)，采用電噴霧離子源ESI，正離子掃描模式，選擇M+H為監(jiān)測離子，流動相為甲酸-乙腈梯度系統(tǒng)。方法檢出限低，較液相色譜靈敏度更高。應(yīng)用本方法對雞肝、牛肉樣品進(jìn)

5、行加標(biāo)回收實驗，雞肝加標(biāo)樣品的回收率為73.5％-92.3％，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小于8.2％；牛肉加標(biāo)樣品的回收率為78.5％-94.2％，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小于9.1％。并用建立的方法測定了市場上銷售的多批雞肝、雞肉、牛肉樣品。此方法的定量限為0.005-0.030mg/kg，完全可以滿足國內(nèi)外有關(guān)法規(guī)的要求，可為肉類樣品中大環(huán)內(nèi)酯類抗生素殘留的監(jiān)督檢驗和殘留監(jiān)控提供技術(shù)支持。 通過上述研究，系統(tǒng)建立了大環(huán)內(nèi)酯的高效液相色譜法、液相色譜-