皺果莧提取物的抗氧化作用和抗癌作用研究.pdf

1、皺果莧(AmaranthusviridisL.)為莧科（Amaranthaceae）莧屬(Amaranthus)一年生草本植物，生長于我國很多地方。一般用作飼草，或直接作為雜草處理，其營養(yǎng)價值豐富，可以入藥，具有清熱解毒的功效，有些亞洲國家如印度、尼泊爾等已將其用作傳統(tǒng)藥物使用。近年來，一些研究表明皺果莧具有抗氧化活性，但對其生物活性和藥用價值的研究仍十分匱乏，因此，開發(fā)皺果莧的醫(yī)藥保健功能是一項非常有意義的工作。本文對皺果莧的抗氧化活

2、性、抗癌活性和其它生理活性進行了研究，以便對其進一步開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。
　　 1.抗氧化活性研究
　　 為了研究皺果莧的抗氧化能力，進行了DPPH自由基清除能力、脂質(zhì)過氧化抑制能力和總酚類物質(zhì)含量的測定。DPPH自由基清除能力的結(jié)果表明:皺果莧甲醇提取物對DPPH自由基的清除能力最強，IC50值為109.25μg/ml。脂質(zhì)過氧化抑制能力的測定采用了亞油酸過氧化抑制方法，結(jié)果表明皺果莧甲醇提取物的抑制能力最強，濃度為

3、100μg/ml時，亞油酸過氧化抑制率達(dá)63.5％?？偡宇愇镔|(zhì)含量測定采用了Folin-Ciocalteu試劑比色法，結(jié)果表明皺果莧甲醇提取物總酚類物質(zhì)含量最高，為221.7mg/g。由于測定結(jié)果顯示皺果莧甲醇提取物的抗氧化能力最強，因此選擇了甲醇作為溶劑對皺果莧進行大量提取，并采用溶劑極性梯度法對提取物進行了萃取。接著采用DPPH自由基清除法，脂質(zhì)過氧化抑制法、羥自由基清除法和超氧陰離子清除法測定了萃取物的抗氧化能力，結(jié)果表明乙醚萃取

4、物和乙酸乙酯萃取物的抗氧化能力較強，對DPPH自由基清除的IC50值分別為74.1μg/ml和70.3μg/ml;濃度為500μg/ml時，亞油酸過氧化抑制率分別為40.1％和39.3％;濃度為1mg/ml時，羥自由基清除率分別為57.5％和57.1％;濃度為1mg/ml時，超氧陰離子清除率分別為56.3％和60.2％。
　　 2.皺果莧乙醚萃取物的抗癌活性研究
　　 MTT分析結(jié)果表明乙醚萃取物對癌細(xì)胞具有較強的細(xì)胞毒

5、性，對人結(jié)腸癌細(xì)胞(HT-29)和人肝癌細(xì)胞(HepG2)有明顯的致細(xì)胞凋亡作用，且具有濃度依賴性，而對人胚胎腎細(xì)胞(HEK293)的細(xì)胞毒性不明顯。乙醚萃取物濃度為400μg/ml時，HT-29細(xì)胞和HepG2細(xì)胞的細(xì)胞存活率分別下降為39.3％和21.5％。顯微鏡觀察結(jié)果顯示，乙醚萃取物處理HT-29細(xì)胞24h后表現(xiàn)出明顯的致細(xì)胞凋亡作用，并具有顯著的濃度依賴性。處理48h后，濃度為50μg/ml的乙醚萃取物即能造成大部分HT-29

6、細(xì)胞的死亡，當(dāng)濃度提高到100μg/ml以上時表現(xiàn)出比陽性對照（10μg/ml的紫杉醇）更強的致細(xì)胞凋亡作用?；钚匝鯚晒舛浚―CFH-DA法）測定結(jié)果表明，隨著乙醚萃取物濃度的增加，HT-29細(xì)胞內(nèi)平均熒光強度(MFI)越來越大。當(dāng)皺果莧乙醚萃取物的濃度由50μg/ml提高到400μg/ml時，MFI值由48.58增加到87.53，說明皺果莧乙醚萃取物能誘導(dǎo)HT-29細(xì)胞內(nèi)的ROS含量的增加。相關(guān)基因表達(dá)情況的研究表明，乙醚萃取物能提

7、高HT-29細(xì)胞內(nèi)caspase-3基因的表達(dá)，且具有濃度劑量效應(yīng)。細(xì)胞周期分析結(jié)果表明，隨著皺果莧乙醚萃取物濃度的增加，HT-29細(xì)胞處于subG1期的細(xì)胞數(shù)量增多，處于G0/G1期和S期的細(xì)胞數(shù)量減少。
　　 3.其它生理活性研究
　　 為了研究皺果莧的抑菌能力，采用紙片法測定了各萃取物對大腸桿菌(Escherichiacoli)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)和腸道沙門氏菌(Salmon

8、ellaenterica)的抑制的抑制作用，結(jié)果表明石油醚萃取物，乙醚萃取物，乙酸乙酯萃取物對大腸桿菌有抑菌活性，其中抑制能力大小為乙醚萃取物＞乙酸乙酯萃取物＞石油醚萃取物;乙醚萃取物和乙酸乙酯萃取物對大腸桿菌和沙門氏菌有抑菌活性，抑制能力大小為乙醚萃取物＞乙酸乙酯萃取物。正丁醇萃取物和剩余水層提取物對三種細(xì)菌皆無抑菌活性。
　　 為了研究皺果莧的抗糖尿病作用，對各萃取物進行了α-葡萄糖苷酶的抑制作用測定，結(jié)果表明各萃取物對α-