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1、黃瓜(CucumissativusL.)是一種重要的蔬菜作物。在露地和保護(hù)地栽培中均存在高溫?zé)岷Γ瑖?yán)重影響黃瓜生產(chǎn)。培育黃瓜耐熱品種是防止熱害的最經(jīng)濟(jì)有效的途徑,而耐熱育種的成效取決于對(duì)耐熱性遺傳機(jī)制和分子機(jī)理的認(rèn)識(shí)。采用現(xiàn)代分子標(biāo)記技術(shù)發(fā)掘我國(guó)黃瓜種質(zhì)中的耐熱基因及其連鎖分子標(biāo)記,可為建立高效的耐熱育種及種質(zhì)改良技術(shù)提供理論依據(jù)。本研究以631-1(耐熱)×602(熱敏)的F2群體作為作圖和耐熱性鑒定群體,對(duì)親本和F2群體分離后代的耐
2、熱性進(jìn)行了鑒定,采用SSR和RAPD分子標(biāo)記構(gòu)建遺傳連鎖圖譜,利用復(fù)合區(qū)間定位方法對(duì)耐熱性進(jìn)行QTL定位。主要研究結(jié)果如下: 本試驗(yàn)研究了黃瓜SSR-PCR反應(yīng)體系中的dNTP、引物、Mg2+、模板DNA和TaqDNA聚合酶等參數(shù)對(duì)擴(kuò)增結(jié)果的影響。對(duì)黃瓜SSR-PCR反應(yīng)體系進(jìn)行了優(yōu)化,其結(jié)果為:20μl反應(yīng)體系中包括dNTP200μlmol/L、Primer0.4μmol/L、Mg2+2.5mmol/L、TaqDNA聚合酶0.
3、5U、模板DNA60ng和1×PCRbuffer。 試驗(yàn)利用耐熱品種631-1和熱敏品種602構(gòu)建包含281個(gè)單株的F2分離群體,并對(duì)其進(jìn)行耐熱性鑒定。對(duì)鑒定結(jié)果進(jìn)行正態(tài)分布檢驗(yàn),其峰度和偏度的絕對(duì)值均小于1,表明F2分離群體電導(dǎo)百分率基本符合正態(tài)分布,此群體適合于QTL分析。 用兩親本對(duì)86對(duì)SSR引物和132條RAPD引物進(jìn)行篩選,再進(jìn)一步對(duì)F2分離群體的281個(gè)單株進(jìn)行分析,結(jié)果檢測(cè)到4個(gè)SSR和7個(gè)RAPD位點(diǎn)與
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