抗IL-6單克隆抗體對自身免疫性心肌炎的保護作用研究.pdf

1、青年人的心衰可由擴張性心肌病引起,病毒性心肌炎反復發(fā)生、遷延不愈是擴張型心肌病的常見病因。病毒性心肌炎在青少年中的患病率為8.03萬/10萬~41.86/10萬。心肌炎的發(fā)病機制包括病毒的直接作用和機體的自身免疫反應。病毒的直接作用發(fā)生較早,進展迅速;由自身免疫所致的損傷較病毒直接損傷發(fā)生時間晚,持續(xù)時間長。包括自身反應性殺傷性T細胞、自身反應性抗體(HRA)、細胞因子介導的心肌損傷。利用豬心肌肌凝蛋白,可在易感動物Lewis大鼠上制造

2、自身免疫心肌炎(Experimental autoimmune myocarditis, EAM)模型,能夠很好的模擬人類病毒性心肌炎所致的自身免疫損傷,基于EAM大鼠的實驗研究為反復感染的心肌炎所致擴心病提供了理論依據(jù)。近年來,國內外研究顯示,Th17細胞、Treg細胞數(shù)量和功能上的平衡失調在自身免疫性疾病的發(fā)展過程中起到了一定的作用[1、2],而IL-6在Th17/Treg平衡重起到了決定平衡方向的關鍵作用。
　　研究目的：<

3、br>　　1.觀察白介素6單克隆抗體(IL-6 mAb)對大鼠自身免疫心肌炎(EAM)的干預療效。
　　2.探討白介素(interleukin,IL)-6在EAM發(fā)急性發(fā)病以及慢性持續(xù)過程中,對輔助性T細胞17/調節(jié)性T細胞(Th17/Treg)平衡的影響。
　　實驗方法：
　　本研究通過對EAM大鼠以及經抗IL-6單克隆抗體干預的EAM大鼠進行心肌組織病理觀察,檢測兩組大鼠脾細胞中Th17細胞、CD4+CD25+Tr

4、eg細胞數(shù)量和功能,測定血清細胞因子,檢測經 IL-6mAb刺激后的脾細胞中細胞因子分泌水平的變化,以及目的基因在疾病發(fā)生發(fā)展過程中mRNA水平的變化等。
　　實驗結果：
　　炎癥積分、纖維化積分、凋亡指數(shù) IL-6mAb干預組較 EAM組明顯下降(P<0.01)。
　　急性峰值期(21d組):EAM組Th17和Treg細胞數(shù)量上調,IL-6mAb干預組則受明顯抑制(P<0.01);
　　血清炎癥因子分泌情況:⑴

5、急性炎癥期:EAM組IL-6、IL-17和TGF-β的濃度升高,IL-6mAb干預組則明顯下降(P<0.01);⑵慢性持續(xù)期:EAM組IL-17水平升高,IL-10、Treg水平降低;IL-6mAb干預組則與正常組無差異。
　　體外IL-6mAb刺激EAM源性脾細胞,培養(yǎng)基中IL-10、IL-17和TGF-β的水平較IgG刺激組明顯降低。
　　外周血轉錄因子STAT3、RORγt、Foxp3 mRNA水平:急性炎癥期STAT

6、3、RORγt、Foxp3 mRNA水平上升,IL-6mAb干預組外周血STAT3、RORγt、FoxP3 mRNA水平下降(P<0.01);慢性持續(xù)期:EAM組,STAT3、RORγt mRNA水平較正常組升高,FoxP3 mRNA水平降低。IL-6mAb干預組則無明顯變化。
　　結論：
　　1.抗IL-6單克隆抗體對大鼠自身免疫性心肌炎具有保護作用;
　　2. Th17、Treg細胞參與EAM急性發(fā)病過程;Th17