5-HT7受體在七氟醚介導(dǎo)的遺忘效應(yīng)中的作用.pdf

1、研究背景:
　　全身麻醉藥的遺忘效應(yīng)已經(jīng)被大量研究所證實。研究發(fā)現(xiàn),異丙酚和亞麻醉劑量的七氟醚、地氟醚和異氟醚均能阻斷情感記憶。由于全身麻醉藥的作用靶點眾多和學(xué)習(xí)記憶過程的復(fù)雜性,目前全身麻醉藥物影響記憶功能的機制尚不清楚。許多研究表明,基底外側(cè)杏仁核(basolateralamygdala,BLA)在記憶調(diào)控中發(fā)揮重要作用,毀損大鼠雙側(cè)BLA后,可阻斷異丙酚和七氟醚介導(dǎo)的遺忘效應(yīng)。且多種藥物或激素需作用于BLA內(nèi)的相應(yīng)受體,才能

2、發(fā)揮其記憶調(diào)節(jié)功能。
　　七氟醚是臨床上常用的吸入麻醉藥,在0.25最低肺泡濃度(Minimumalveolar concentration,MAC)時即能明顯抑制記憶形成。本實驗室研究表明:2％七氟醚麻醉2小時能直接損害大鼠被動回避(inhibitory avoidance.IA)記憶鞏固。BLA可調(diào)控記憶在其它腦區(qū)的鞏固,其中,BLA-海馬通路最引人關(guān)注。本實驗室的前期研究證實,“BLA-海馬”通路參與異丙酚和七氟醚的遺忘機制

3、。進一步的研究表明,七氟醚引起的記憶受損與BLA去甲腎上腺素系統(tǒng)和海馬記憶相關(guān)蛋白Arc調(diào)控的相互作用有關(guān)。BLA中存在多種受體,例如5-羥色胺(5-hydroxytryptamin,5-HT)受體,這些受體是否參與“BLA-海馬”通路,從而在全身麻醉藥引起的記憶受損中發(fā)揮作用呢?
　　已有很多研究報道了5-HT1A受體在學(xué)習(xí)記憶中的作用,然而,關(guān)于5-HT7受體在學(xué)習(xí)記憶中的研究尚比較少。本實驗擬在前期研究基礎(chǔ)上,通過雙側(cè)BLA

4、給予5-HT7受體的拮抗劑和激動劑,分別為SB269970和AS-19的方法,探究七氟醚處理對fear conditioning訓(xùn)練后的大鼠freezing的程度以及海馬記憶相關(guān)蛋白(c-fos和Arc)的表達的影響,同時觀察七氟醚對海馬神經(jīng)元凋亡的影響。
　　方法:
　　雄性SD大鼠隨機分為10組:生理鹽水-空氧混合氣處理組,生理鹽水-七氟醚處理組,SB269970(20 pmol/0.2μl)-七氟醚處理組,SB2699

5、70(50 pmol/0.2μl)-七氟醚處理組,SB269970(100 pmol/0.2μl)-七氟醚處理組,SB269970(100 pmol/0.2μl)-空氧混合氣處理組,AS-19(2pmol/0.2μl)-七氟醚處理組,AS-19(10 pmol/0.2μl)-七氟醚處理組,AS-19(50 pmol/0.2μl)-七氟醚處理組和AS-19(50 pmol/0.2μl)-空氧混合氣處理組。首先,根據(jù)分組向雙側(cè)BLA給予5-

6、HT7受體拮抗劑SB269970或激動劑AS-19或等體積的生理鹽水,30 min后吸入2％七氟醚或空氧混合氣體2 h,10 min后通過open-field測定大鼠基礎(chǔ)運動能力,15 min后待大鼠恢復(fù)后進行fear conditioning訓(xùn)練;24 h后進行fear conditioning的contextual test和cued test。吸入空氧混合氣體的大鼠作為對照組。
　　一批大鼠在fear conditionin

7、g后1h被處死,用于檢測記憶相關(guān)蛋白c-fos和Arc表達水平。
　　另一批大鼠,雙側(cè)BLA置管后,給予生理鹽水,30 min后吸入七氟醚2 h或6 h,15 min后待大鼠恢復(fù)清醒后進行fear conditioning訓(xùn)練,24h后處死大鼠,用于檢測海馬神經(jīng)元凋亡相關(guān)的指標。
　　結(jié)果:
　　1.與空氧混合氣對照組相比,fear conditioning訓(xùn)練前吸入2％七氟醚明顯降低大鼠24小時的freezing程度

8、。5-HT7受體激動劑AS-19進一步加重或拮抗劑SB269970可逆轉(zhuǎn)七氟醚的遺忘效應(yīng)。
　　2.fear conditioning訓(xùn)練前吸入2％七氟醚亦能顯著降低Arc在海馬的表達。5-HT7受體激動劑AS-19進一步降低或拮抗劑SB269970可逆轉(zhuǎn)七氟醚對記憶相關(guān)蛋白的表達的抑制。然而,七氟醚和BLA灌注藥物均不影響海馬c-fos的表達。
　　3.fear conditioning訓(xùn)練前吸入2％七氟醚2h或6h均不能