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文檔簡介
1、目的:本研究擬評價鐵代謝紊亂在七氟醚和異氟醚致小鼠認(rèn)知功能障礙中的作用。
方法:清潔級健康雄性昆明小鼠24只,12月齡,體重45~55 g,采用隨機(jī)數(shù)字表法,將其分為3組(n=8):對照組(Con組)、七氟醚組(Sev組)和異氟醚組(Iso組)。Sev組吸入2%七氟醚6 h,Iso組吸入1.4%異氟醚6 h,載氣為純氧,Con組僅吸入純氧6 h。各組小鼠于麻醉處理前進(jìn)行Morris水迷宮定位航行訓(xùn)練,歷時5 d,每天4次。麻醉
2、結(jié)束后12 h再次進(jìn)行Morris水迷宮實(shí)驗(yàn),通過攝像機(jī)和計(jì)算機(jī)記錄各組小鼠水迷宮運(yùn)動軌跡,逃避潛伏期和尋找平臺的總路程。隨后,腹腔注射0.4%戊巴比妥鈉(1 ml/100 g)麻醉小鼠,剪開胸腔暴露心臟,使用0.9%氯化鈉對小鼠進(jìn)行血液灌流,剪下頭部,剝?nèi)∧X組織,分離出大腦皮層和海馬組織。采用Western blot法定性檢測各組小鼠皮層和海馬區(qū)鐵代謝相關(guān)蛋白ferritin-L、ferritin-H、TfR1、FPN1、DMT1(+
3、IRE)以及磷酸化Tau蛋白表達(dá)水平,通過化學(xué)發(fā)光凝膠成像儀獲取相應(yīng)的蛋白條帶圖,然后使用Image-Pro Plus6.0軟件分析各蛋白條帶的積分光密度值。以目的條帶積分光密度值與內(nèi)參蛋白條帶積分光密度值的比值反映目的蛋白的表達(dá)水平。采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,以上正態(tài)分布的計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,組間比較采用單因素方差分析,P<0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)果:
1.Morris水迷宮
4、實(shí)驗(yàn)結(jié)果:麻醉處理前,三組小鼠尋找平臺的總路程和逃避潛伏期差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);與Con組小鼠相比,Sev組和Iso組小鼠尋找平臺的總路程和逃避潛伏期均延長(P<0.05)。
2.鐵代謝相關(guān)蛋白表達(dá)水平的檢測結(jié)果:與Con組相比,Sev組小鼠的大腦皮層及海馬中ferritin-L、ferritin-H、FPN1表達(dá)均上調(diào),TfR1表達(dá)下調(diào)(P<0.05),DMT1(+IRE)表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);與
5、Con組相比,Iso組小鼠大腦皮層和海馬中ferritin-L、ferritin-H、TfR1、FPN1和DMT1(+IRE)的表達(dá)水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
3.磷酸化Tau蛋白表達(dá)水平的檢測結(jié)果:與Con組相比,Sev組和Iso組小鼠大腦皮層和海馬中磷酸化Tau蛋白表達(dá)均上調(diào)(P<0.05)。
結(jié)論:七氟醚導(dǎo)致小鼠認(rèn)知功能障礙的機(jī)制與鐵代謝紊亂有關(guān),而異氟醚導(dǎo)致小鼠認(rèn)知功能障礙的過程中并沒有鐵代謝異常
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