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1、馬鈴薯再生體系的建立是利用生活的植物細(xì)胞具有全能性的理論基礎(chǔ),通過愈傷組織階段,再分化形成新的植株。它是進(jìn)行諸多研究的基礎(chǔ),特別是近年來發(fā)展起來的轉(zhuǎn)基因技術(shù),更有賴于一個遺傳穩(wěn)定性高的再生體系。但在植物組織培養(yǎng)過程中,經(jīng)常會發(fā)生體細(xì)胞無性系變異。為進(jìn)一步了解馬鈴薯再生過程及其再生植株的變異情況,為進(jìn)行其他研究奠定基礎(chǔ),本試驗以馬鈴薯 10 個品種為供試材料,先以馬鈴薯大西洋品種為基礎(chǔ)對其再生過程中的激素種類、濃度、愈傷培養(yǎng)天數(shù)等影響因素
2、進(jìn)行了研究,再將建立起的再生體系應(yīng)用于其他 9 種材料,比較不同基因型之間的再生差異;最后對大西洋品種的再生植株的遺傳變異進(jìn)行測定。研究結(jié)果如下: 1.馬鈴薯大西洋品種的葉片與莖段愈傷組織誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基分別為MS+6-BA 2.5mg/L+NAA 0.3mg/L、MS+6-BA 2.5mg/L+NAA 0.4mg/L,誘導(dǎo)率均可達(dá)100%;葉片與莖段愈傷誘導(dǎo)不定芽分化的最佳培養(yǎng)基都為 MS+6-BA 5.0mg/L+Nhh0.
3、1mg/L+GA<,3> 10mg/L,其不定芽的分化率分別達(dá)100%、73.3%。將上述再生體系用于其它9個品種,發(fā)現(xiàn)不同基因型馬鈴薯的再生存在較大差異,該再生體系只適用于其中兩個品種。 2.2,4-D 對誘導(dǎo)愈傷的效果較好,但它對不定芽的分化具有一定的抑制作用;而 Ihh 對愈傷的誘導(dǎo)率不佳,其誘導(dǎo)的愈傷在誘導(dǎo)不定芽分化時的頻率卻比較高。將不同培養(yǎng)天數(shù)的愈傷用于不定芽分化,發(fā)現(xiàn)葉片愈傷在培養(yǎng)14天后用于不定芽分化效果最好,而
4、莖段愈傷則在培養(yǎng)21天后的效果最佳,但普遍葉片愈傷的分化率要高于莖段的。 3.同時還發(fā)現(xiàn)GA<,3>在不定芽的分化階段是必不可少的。在未添加GA<,3>的分化培養(yǎng)基上無芽分化,只要在分化培養(yǎng)基中添加有GA<,3>,基本上都有芽分化,但其最佳濃度為 10mg/L。 4.通過農(nóng)藝學(xué)性狀的觀察,100 個再生植株不存在很大程度的變異,只有少數(shù)植株發(fā)生幾個性狀的微小變化或有極個別的在個別性狀上出現(xiàn)較大差異。通過RAPD 分析,1
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