羅格列酮對胰島素抵抗大鼠血清visfatin、VCAM-1水平及內(nèi)臟脂肪組織visfatin mRNA表達的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:觀察高脂飲食誘導胰島素抵抗大鼠血清visfatin與血管細胞間黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)的變化,分析visfatin、VCAM-1及胰島素抵抗之間的關系。通過半定量RT-PCR方法檢測大鼠內(nèi)臟脂肪組織visfatin的表達,并探討羅格列酮對血清visfatin、VCAM-1水平及內(nèi)臟脂肪組織visfatin mRNA表達的影響,分析visfatin在胰島素抵抗和

2、糖尿病發(fā)生中的可能機制。
   方法:雄性Wistar大鼠50只,適應性喂養(yǎng)1周后,隨機分為正常對照組(normal control group,NC)20只,高脂飲食組(high-fat-fed group,HF)30只。正常對照組給予基礎飼料(熱量組成:碳水化合物占65.5%,脂肪占10.3%,蛋白質(zhì)占24.2%),總熱量為348 kcal/100g;高脂飲食組給予高脂飼料(熱量組成為脂肪59.8%,碳水化合物20.1%,蛋

3、白質(zhì)20.1%),總熱量為501 kcal/100g。2組每日等熱量投喂飼料,4周后每組各隨機抽取10只大鼠,禁食10小時過夜,內(nèi)眥靜脈取血,分離血清,測定高脂飲食4周大鼠的空腹胰島素,并行高胰島素-正葡萄糖鉗夾實驗(hyperinsulinaemic -euglycaemic lamp),了解大鼠葡萄糖輸注率(glucose infusion rate,GIR)的變化,判斷胰島素抵抗造模是否成功,確認造模成功后,高脂飲食組剩余20只大

4、鼠隨機分為高脂對照組(high fat control group,HC)、羅格列酮組(rosiglitazone group,RSG),每組1 O只,在原飼養(yǎng)條件不變的基礎上,開始藥物干預,RSG組給予馬來酸羅格列酮3 mg·kg-1-d-1灌胃,NC組和HC組給予等量生理鹽水灌胃,每日一次,每周稱體重一次,根據(jù)體重調(diào)整給藥量。繼續(xù)喂養(yǎng)8周。療程結束后內(nèi)眥靜脈取血,分離血清,測定各組大鼠血脂、空腹胰島素(fasting insulin

5、,F(xiàn)INS)、visfatin和VCAM-1、游離脂肪酸(free fatty acid,F(xiàn)FA)等指標,并進行相關性分析。其中血清visfatin 和VCAM-1采用酶聯(lián)免疫(ELISA)法測定,血清FFA用銅顯色法測定。并行高胰島素正葡萄糖鉗夾實驗,了解各組大鼠GIR的變化,4周和12周鉗夾結束后放血處死老鼠,準確稱量腎臟及附睪周圍脂肪重量,即為內(nèi)臟脂肪總重量。脂肪組織置于液氮中快速冷卻后,放在-70℃冰箱中保存?zhèn)溆谩2捎冒攵縍T

6、-PCR方法檢測三組大鼠內(nèi)臟脂肪組織visfatin mRNA表達水平。所得數(shù)據(jù)經(jīng)過整理采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行t檢驗或方差分析,P<0.05認為差異有統(tǒng)計學意義。
   結果:
   1.高脂飲食喂養(yǎng)4周大鼠體重較正常對照組有所增加,但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);空腹血糖(fasting blood glucose,F(xiàn)BG)、FINS較正常對照組明顯升高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01);GIR較正常對照

7、組明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。
   2.高脂喂養(yǎng)12周大鼠甘油三酯(triglyceride,TG)、總膽固醇(total cholesterol,TC)、FFA、FBG均不同程度升高,與正常對照組比差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);FINS明顯升高,與正常對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01);GIR明顯下降,與正常對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
   3.高脂對照組大鼠體重較正常對

8、照組升高,但差異無統(tǒng)計學意義,但內(nèi)臟脂肪總重量與正常對照組比較明顯增加,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01);高脂對照組血清visfatin、VCAM-1水平較正常對照組明顯升高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01,P<0.05)。
   4.羅格列酮組與高脂對照組比較,血清TC、TG、FBG均不同程度降低,GIR明顯升高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);FFA、GIR明顯降低,與高脂對照組比差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。

9、   5.羅格列酮組與高脂對照組比較,血清VCAM-1水平下降,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01);血清visfatin水平無明顯變化,差異無統(tǒng)計學意義,內(nèi)臟脂肪組織總重量較高脂對照組降低,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
   6.羅格列酮組、高脂對照組與正常對照組比較,內(nèi)臟脂肪組織visfatin mRNA表達均增強,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),羅格列酮組與高脂對照組比較,內(nèi)臟脂肪組織visfatin mRNA表達無

10、明顯差異。
   7.相關分析顯示血清visfatin水平與VCAM-1、TG、TC水平及內(nèi)臟脂肪含量呈正相關(r=0.910,P<0.01;r=0.499,P<0.01;r=0.367,P<0.05:r=0.446,P<0.05);以VCAM-1為因變量,以visfatin、TG、TC、FFA為自變量進行多元逐步回歸分析顯示visfatin是VCAM-1的獨立相關因素。
   結論:
   1.高脂飲食大鼠FB

11、G、FINS升高,GIR降低,高脂飲食成功誘導胰島素抵抗大鼠模型。
   2.高脂飲食大鼠血清visfatin與VCAM-1水平均升高,內(nèi)臟脂肪組織visfatin mRNA表達增強,visfatin、VCAM-1在胰島素抵抗的發(fā)生中起了重要作用。
   3.羅格列酮可以降低高脂飲食大鼠FBG、FINS、TC、TG、FFA,增加GIR,改善胰島素敏感性??山档脱錠CAM-1水平,說明羅格列酮在改善血管內(nèi)皮功能方面起了重

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