姜梔子配伍炮制的物質(zhì)基礎(chǔ)內(nèi)涵研究.pdf

1、梔子為茜草科植物梔子(Gardenia jasminoides Ellis的干燥成熟果實(shí)。味苦、性寒，歸心、肝、肺、三焦經(jīng)，具有瀉火除煩，清熱利尿，涼血解毒的功能。用于治療熱病心煩，黃疸尿赤，瀉熱吐衄，目赤腫痛，火毒瘡瘍等。梔子作為一味常用中藥，廣泛應(yīng)用于中醫(yī)臨床及中藥復(fù)方制劑中。
　　中醫(yī)傳統(tǒng)理論認(rèn)為，梔子生品苦寒之性甚強(qiáng)，經(jīng)辛溫的姜汁炮制后，可緩和其苦寒之性、增強(qiáng)溫中止嘔作用。梔子姜制前后功效的差異，根源是其內(nèi)在物質(zhì)基礎(chǔ)發(fā)生變

2、化。因此，本論文對生姜的化學(xué)成分進(jìn)行了初步研究，開展了姜梔子炮制工藝、梔子姜制前后揮發(fā)油成分的比較分析以及主要成分(二萜色素類、環(huán)烯醚萜苷類)的變化規(guī)律研究，初步揭示梔子姜制原理的科學(xué)內(nèi)涵，為梔子不同飲片的質(zhì)量評價(jià)提供科學(xué)依據(jù)。
　　本論文分為六個(gè)部分：
　　第一章文獻(xiàn)研究
　　查閱了近30年來有關(guān)姜梔子的文獻(xiàn)研究資料，對姜梔子的炮制歷史沿革、化學(xué)成分及藥理作用等研究文獻(xiàn)進(jìn)行了系統(tǒng)地歸納和分析，為本課題的順利實(shí)施提供參

3、考依據(jù)。
　　第二章生姜化學(xué)成分研究
　　生姜以95％乙醇滲漉提取，提取物經(jīng)硅膠柱色譜、制備HPLC等方法進(jìn)行分離、純化，通過光譜方法(1H-NMR、13C-NMR、HMQC、HMBC和MS)鑒定化合物結(jié)構(gòu)。結(jié)果從生姜中共分離得到了13個(gè)化合物，包括8個(gè)姜辣素類化合物、3個(gè)二苯基庚烷類化合物、1個(gè)脂肪醇類化合物和1個(gè)甾體類化合物。分別為：5-羥基-1-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-1，4-癸二烯-3-酮(5-hydroxy-

4、1-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-1，4-decadien-3-one，1)、[6]-姜酚([6]-gingerol，2)、[8]-姜酚([8]-gingerol，3)、[10]-姜酚([10]-gingerol，4)、3，5-二羥基-1-(4-羥基-3-甲氧基苯基)癸烷(3，5-dihydroxy-1-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)decane，5)、3，5-二羥基-1-(3，4-二甲

5、氧基苯基)癸烷(3，5-dihydroxy-1-(3，4-dimethoxyphenyl)decane，6)、[4]-姜辣二醇([4]-gingerdiol，7)、4-羥基-3-甲氧基-苯丁醇(4-hydroxy-3-methoxy-benzenebutanol，8)、1，7-雙(4-羥基-3-甲氧基苯基)-4-庚烯-3-酮(1，7-bis(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)hept-4-en-3-one，9)、3，5

6、-二乙酰氧基-1-(4-羥基-3，5-二甲氧基苯基)-7-(3，4-二羥基苯基)-庚烷(3，5-diacetoxy-1-(4-hydroxy-3，5-dimethoxypheny)-7-(3，4-dihydroxyphenyl)heptane，10)、5-羥基-1，7-雙(4-羥基-3-甲氧基苯基)-3-庚酮(5-hydroxy-1，7-bis(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-3-heptanon，11)、二十四烷

7、醇(Tetracosanol，12)、β-谷甾醇(β-sitostetrol，13)。其中，化合物1為新化合物，化合物8為首次從生姜中分離得到。
　　第三章姜梔子炮制工藝研究
　　以京尼平苷(Geniposide，G-2)、藏紅花酸糖苷-1(Crocin-1，C-1)和藏紅花酸糖苷-2(Crocin-2，C-2)含量為指標(biāo)，采用L9(34)正交試驗(yàn)法，選擇烘制溫度、烘制時(shí)間和生姜用量3個(gè)因素，每個(gè)因素取3個(gè)水平，對姜梔子的炮

8、制工藝進(jìn)行優(yōu)選，在此基礎(chǔ)上，進(jìn)一步以飲片外觀性狀和內(nèi)在有效成分含量為依據(jù)進(jìn)行了姜梔子的炒制工藝驗(yàn)證研究，確定最佳炮制工藝為生梔子飲片加12.5％姜汁(藥材：生姜=8:1)拌勻，悶潤，待姜汁被吸盡后，在180℃(鍋底溫度)炒制6min至表面呈焦黃色，取出，放涼。其中，生姜用量為顯著性影響因素。
　　第四章梔子姜制前后揮發(fā)油成分的變化分析
　　本試驗(yàn)采用水蒸氣蒸餾法提取梔子、生姜和姜梔子中的揮發(fā)油，利用GC-MS鑒定并比較分析3

9、個(gè)樣品中化學(xué)成分變化，并應(yīng)用峰面積歸一化法測定各成分的相對質(zhì)量分?jǐn)?shù)，結(jié)果梔子、生姜和姜梔子中揮發(fā)油的含量依次為1.0、1.0、1.5μL·g-1，從梔子、生姜和姜梔子揮發(fā)油中分別檢出42、75和77個(gè)色譜峰，總共鑒定了89種化合物，其中梔子30種、生姜58種、姜梔子67種，分別占揮發(fā)油總量的94.10、90.52、94.38％。梔子經(jīng)姜制后，除少數(shù)成分的含量有所升高，多數(shù)梔子和生姜中原有成分的含量有所降低，同時(shí)還檢測出一些醛酮類新增成分

10、，推測與姜梔子的炮制過程密切相關(guān)。結(jié)果表明生梔子、姜梔子的GC圖譜有明顯差異，梔子經(jīng)姜制后揮發(fā)油成分在組成和含量上均發(fā)生了明顯變化。
　　第五章梔子姜制前后主要化學(xué)成分的含量分析
　　本試驗(yàn)首次以UPLC法測定梔子姜制前后4個(gè)主要二萜色素類成分的含量，并結(jié)合HPLC法測定梔子姜制前后2個(gè)主要環(huán)烯醚萜苷類成分的含量，從生、姜梔子飲片(各10批)的測定結(jié)果可以看出：梔子不同產(chǎn)地、不同飲片中均含有藏紅花酸糖苷-1(Crocin-1

11、，C-1)、藏紅花酸糖苷-2(Crocin-2，C-2)、藏紅花酸糖苷-3(Crocin-3，C-3)、藏紅花酸(Crocetin，C)、京尼平-1-O-β-龍膽雙糖苷(Genipin-1-O-β-Gentiobioside，G-1)、京尼平苷(Geniposide，G-2)等主要有效成分，但含量差異較大；梔子經(jīng)姜制后，二萜色素類成分總量略有降低，而環(huán)烯醚萜苷類成分總量略有增加，主成分含量總體上呈增加的變化趨勢，但差異并不顯著。以上研究

12、為闡明梔子姜制過程中的化學(xué)成分變化規(guī)律及制定姜梔子不同飲片的質(zhì)量評價(jià)指標(biāo)奠定了基礎(chǔ)。
　　第六章結(jié)果與討論
　　對生姜進(jìn)行了系統(tǒng)地化學(xué)成分研究，分離、鑒定了13個(gè)化合物，其中化合物1為新化合物，化合物8為首次從生姜中分離得到，豐富了生姜的化學(xué)成分研究內(nèi)容；采用L9(34)正交試驗(yàn)法，并結(jié)合飲片外觀質(zhì)量和內(nèi)在有效成分含量對姜梔子的炮制工藝進(jìn)行優(yōu)選，為數(shù)據(jù)化、規(guī)范化姜梔子的炮制工藝提供依據(jù)；首次以GC-MS法比較分析了梔子姜制前

13、后揮發(fā)油中的化學(xué)成分在組成和含量上的變化規(guī)律，梔子姜制前后的GC圖譜有明顯差異，可用于定性鑒別生、姜梔子，為同類姜制飲片的真、偽鑒別提供了可靠線索；首次以UPLC法測定梔子姜制前后4個(gè)主要二萜色素類成分的含量，并結(jié)合HPLC法對2個(gè)主要環(huán)烯醚萜苷類成分的含量進(jìn)行了分析，結(jié)果2類成分在梔子姜制前后總體上差異并不顯著，結(jié)合揮發(fā)油成分的變化情況，推測梔子姜制前后功效差異與生姜“配伍炮制”密切相關(guān)。通過以上研究內(nèi)容，初步揭示了梔子姜制前后其化學(xué)