基于梔子炒炭存性的物質(zhì)基礎(chǔ)內(nèi)涵研究.pdf

1、梔子來(lái)源于茜草科植物梔子Gardenia jasminoids Ellis的干燥成熟果實(shí)，梔子生品苦寒之性甚強(qiáng)，臨床上多以炮制品組方配伍入藥，梔子炒炭后善于涼血止血，梔子炒炭前后的功效變化與其內(nèi)在的化學(xué)物質(zhì)組成變化密切相關(guān)。本論文研究?jī)?nèi)容來(lái)源于國(guó)家自然基金課題“基于梔子炒炭存性的科學(xué)內(nèi)涵探究”，以梔子炒炭存性的化學(xué)物質(zhì)變化為切入點(diǎn)，本文通過(guò)現(xiàn)代化學(xué)、分析、藥理等研究手段，以HPLC、LC-MS、GC-MS、多成分定量、以及多成分模擬炮制

2、相結(jié)合，對(duì)梔子炒炭前后的環(huán)烯醚萜類、二萜色素類、酚酸類、揮發(fā)油等化學(xué)物質(zhì)變化進(jìn)行了較為系統(tǒng)的研究;同時(shí)從飲片和主成分配伍二個(gè)層次，開(kāi)展了梔子炒炭前后清熱瀉火、涼血止血藥理作用的比較研究，探討梔子炒炭止血的物質(zhì)基礎(chǔ)，初步闡明了梔子炒炭存性的物質(zhì)基礎(chǔ)內(nèi)涵。
　　本論文具體內(nèi)容如下:
　　第一章、文獻(xiàn)研究
　　查閱了近30年來(lái)有關(guān)梔子和梔子炭的文獻(xiàn)研究資料，對(duì)梔子的化學(xué)成分，梔子炭的古代炮制歷史沿革，炮制工藝研究現(xiàn)狀，化學(xué)成

3、分及其藥理作用及其質(zhì)量評(píng)價(jià)等研究文獻(xiàn)進(jìn)行了系統(tǒng)的歸納分析與總結(jié)。
　　第二章、梔子樣品采集與飲片制備采集
　　中國(guó)藥典收載的梔子為原料藥材，依法制備成生梔子和梔子炭，收集了多批次市售飲片，為開(kāi)展梔子炒炭前后不同飲片的化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)內(nèi)涵及藥理活性比較研究提供了實(shí)驗(yàn)用樣品。
　　第三章、梔子炒炭前后HPLC指紋圖譜研究
　　及主要色譜峰指認(rèn)以多重指紋圖譜分析法，研究建立了生梔子、梔子炭2種飲片2個(gè)檢測(cè)波長(zhǎng)(238nm，

4、440nm)下HPLC指紋圖譜分析方法，通過(guò)生梔子12批次、梔子炭15個(gè)批次的比較分析，建立了梔子飲片在238nm和440nm兩個(gè)檢測(cè)波長(zhǎng)的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜;結(jié)果顯示，梔子炭品與生品相比，238nm下的HPLC整體圖貌差異不顯著，以440nm下的HPLC圖譜變化明顯。以對(duì)照品比對(duì)法分別指認(rèn)了238nm下生梔子、梔子炭中9個(gè)、6個(gè)色譜峰，均為環(huán)烯醚萜苷類成分。440nm下，生梔子指認(rèn)出4個(gè)、梔子炭指認(rèn)了4個(gè)二萜色素類成分，初步揭示了梔子炒炭前

5、后的化學(xué)成分變化規(guī)律及其化學(xué)成分組成。
　　第四章、生梔子、梔子炭的LC-MS鑒別研究
　　以液相色譜-電噴霧質(zhì)譜(HPLC-ESI-MS)聯(lián)用技術(shù)的方法，通過(guò)正負(fù)離子模式、主要碎片峰及紫外吸收特征等結(jié)構(gòu)信息，首次對(duì)生梔子、梔子炭的主要成分進(jìn)行鑒定歸屬，結(jié)果推斷了4類共24個(gè)化合物質(zhì)譜信息，鑒定了21個(gè)化合物結(jié)構(gòu)（生梔子21個(gè)，梔子炭2個(gè)），包括環(huán)烯醚萜苷類9個(gè)、二萜色素類8個(gè)、黃酮苷類1個(gè)、有機(jī)酸類3個(gè)，歸納了3個(gè)未見(jiàn)文獻(xiàn)

6、報(bào)道的化合物的質(zhì)譜信息（生梔子2個(gè)，梔子炭3個(gè)），通過(guò)其主要碎片峰以及紫外光譜信息，推測(cè)為咖啡酰有機(jī)酸、和西紅花苷類成分。同時(shí)對(duì)環(huán)烯醚萜類、有機(jī)酸類、二萜色素類成分的裂解規(guī)律進(jìn)行了歸納總結(jié)，為深入研究梔子化學(xué)成分、發(fā)現(xiàn)新的化合物提供了重要參考，為闡釋梔子炒炭前后的化學(xué)成分變化規(guī)律提供科學(xué)依據(jù)。
　　第五章、梔子炒炭前后主要成分定量比較研究
　　首次以HPLC法、2個(gè)檢測(cè)波長(zhǎng)同時(shí)測(cè)定了梔子炒炭前后3種環(huán)烯醚萜苷類成分的含量，以

7、UPLC法比較了梔子炒炭前后4種二萜色素類成分的含量;結(jié)果顯示，梔子炒炭后3個(gè)環(huán)烯醚萜苷類成分整體上呈下降趨勢(shì)，總量約降低了40-50％。炒炭過(guò)程85％以上的色素類成分遭到了破壞，以色素類成分的變化尤為顯著，初步闡明了梔子炒炭存性可能的物質(zhì)基礎(chǔ)內(nèi)涵變化。
　　第六章、梔子炒炭前后揮發(fā)油成分的變化分析
　　以GC-MS法首次對(duì)梔子炒炭前后低極性成分進(jìn)行了較為系統(tǒng)的分析，從生梔子、梔子炭揮發(fā)油中共鑒定了77種化合物，其中生梔子4

8、4個(gè)，梔子炭43個(gè)，分別占揮發(fā)油總量的91.97、90.75％;已鑒定的77種化合物中，二者共有成分10個(gè);結(jié)果表明生梔子、梔子炭揮發(fā)油類成分在化學(xué)組成和相對(duì)含量上發(fā)生了明顯變化，可用于鑒別區(qū)分生梔子和梔子炭。
　　第七章、梔子炒制過(guò)程對(duì)鞣質(zhì)含量及其吸附性的比較研究
　　以分光光度法等對(duì)生梔子、焦梔子、梔子炭的鞣質(zhì)含量、吸附力等進(jìn)行了比較研究，結(jié)果梔子炭品的吸附力、鞣質(zhì)含量最高，炭品的pH值比炒焦品低，而電導(dǎo)率無(wú)明顯規(guī)律;初

9、步闡釋了梔子炒炭止血可能的化學(xué)物質(zhì)，炭素吸附力、鞣質(zhì)及pH值特征可以作為炒炭質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制的依據(jù)，為炭藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定提供了可靠的線索。
　　第八章、梔子炒炭前后主要變化
　　成分加熱模擬驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)首次多成分組合樣品（G-1、G-2、G-3和C-1），開(kāi)展了梔子主要變化成分的模擬加熱炮制實(shí)驗(yàn)。初步驗(yàn)證了4個(gè)主成分的變化規(guī)律，即隨著加熱溫度的提高，4個(gè)成分發(fā)生破壞或轉(zhuǎn)化的過(guò)程，其中環(huán)烯醚萜苷類成分較二萜色素類成分穩(wěn)定，與指紋圖譜研

10、究結(jié)果基本一致。
　　第九章、梔子炒炭前后主成分群藥理作用比較研究
　　以生梔子、梔子炭為研究對(duì)象，從水提物和主成分群組合2個(gè)層次，開(kāi)展了梔子炒炭前后清熱瀉火、涼血止血的藥理作用比較研究;結(jié)果表明梔子炒炭后仍有較好的解熱、抗炎作用，炒炭后能明顯縮短凝血酶原時(shí)間，血栓長(zhǎng)度增加，顯示梔子炒炭后止血作用增強(qiáng)的同時(shí)，仍具有與生梔子類似的解熱、抗炎作用。從現(xiàn)代藥效學(xué)角度，初步揭示梔子炒炭存性、炒炭止血作用增強(qiáng)的科學(xué)內(nèi)涵。
　　第

11、十章、結(jié)果與討論
　　本論文在對(duì)梔子系統(tǒng)的文獻(xiàn)調(diào)研基礎(chǔ)上，通過(guò)生梔子、梔子炭的HPLC指紋圖譜比較分析和主要色譜峰的指認(rèn)，初步闡釋了梔子炒炭前后化學(xué)成分的組合及其變化規(guī)律;以LC-MS法鑒定分析了生梔子、梔子炭中4類共24個(gè)化合物的結(jié)構(gòu)信息，歸納分析了未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道的3個(gè)化合物可能的結(jié)構(gòu)類型;以HPLC、UPLC法定量分析了梔子炒炭前后2類共7個(gè)成分（環(huán)烯醚萜苷類3個(gè)、二萜色素類4個(gè)）含量變化情況;以多成分組合模擬加熱炮制過(guò)程研究，

12、基本驗(yàn)證了梔子飲片中2類主要化學(xué)成分的變化趨勢(shì)。以GC-MS法比較分析了梔子炒炭前后低極性揮發(fā)油類成分的變化情況，以上研究初步揭示了生梔子、梔子炭的化學(xué)成分組成及其變化規(guī)律，基本闡釋了梔子炒炭存性的物質(zhì)基礎(chǔ)內(nèi)涵。通過(guò)對(duì)梔子炒制過(guò)程鞣質(zhì)含量及其吸附性的比較研究，初步揭示了梔子炒炭止血可能的化學(xué)物質(zhì)，研究結(jié)果提示炭素吸附力、鞣質(zhì)及pH值特征可以作為炒炭質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制的依據(jù)，為梔子炒炭炮制工藝參數(shù)制定提供了現(xiàn)代科學(xué)數(shù)據(jù)。通過(guò)對(duì)梔子炒炭前后主成分