強極性中藥組分的親水作用色譜保留行為研究.pdf

1、反相色譜是目前應(yīng)用最為廣泛的一種液相色譜模式，它能分析分離大多數(shù)有機化合物，但對于強極性化合物，反相色譜并不能提供很好的分離。與反相色譜不同，親水色譜使用極性固定相、水/有機溶劑作為流動相，能對強極性化合物提供很好的分離，已廣泛應(yīng)用于糖類、氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)、核苷、藥物等的分析分離。本文采用二醇基、氨基、δ-葡萄糖酸內(nèi)酯三種鍵合固定相，通過改變流動相中有機溶劑、鹽和有機酸的種類及其濃度、柱溫等條件，系統(tǒng)研究了強極性中藥組分在親水作用色

2、譜中的保留行為，期望為中藥有效成分的分離提取奠定基礎(chǔ)。具體工作如下：
　　 ⑴通過改變流動相中乙腈、甲醇和四氫呋喃的濃度，研究了有機溶劑種類及其濃度對溶質(zhì)保留行為的影響。一般地，流動相中水比例在0-100％(v/v)變化時，溶質(zhì)的保留隨水濃度變化呈“U”型曲線，證明所用溶質(zhì)的保留屬于親水色譜和反相色譜的混合保留機理，而“U”型曲線形狀與有機溶劑、固定相性質(zhì)和溶質(zhì)分子結(jié)構(gòu)有關(guān)。在同一固定相上，采用乙腈時，溶質(zhì)的保留最強。
　

3、　 ⑵流動相水相中緩沖鹽分別選擇甲酸銨、甲酸鈉、乙酸鈉、乙酸銨，通過改變鹽濃度研究了溶質(zhì)在三種固定相上的保留行為。在二醇硅膠中，溶質(zhì)保留均隨鹽濃度增加而增強，而在氨丙基硅膠和δ-葡萄糖酸內(nèi)酯鍵合硅膠中，酸性溶質(zhì)保留隨鹽濃度增加而減弱，分析了產(chǎn)生該現(xiàn)象的原因。還發(fā)現(xiàn)，鹽種類對溶質(zhì)保留的影響不符合Hofmeister效應(yīng)，沒有規(guī)律可循。
　　 ⑶研究了流動相中添加的乙酸、甲酸、三氟乙酸對溶質(zhì)在固定相上保留行為的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在二

4、醇、氨丙基和δ-葡萄糖酸內(nèi)酯鍵合固定相上，外加酸對中性溶質(zhì)保留影響較小，而對酸性溶質(zhì)保留影響較大。提出在中藥組分的分析中，流動相中乙酸、甲酸添加量應(yīng)控制在0-0.5％，三氟乙酸應(yīng)控制在0-0.1％為宜。
　　 ⑷在10～50℃范圍內(nèi)研究了柱溫對溶質(zhì)保留的影響。隨著溫度的升高，在二醇硅膠中，溶質(zhì)保留均降低；而在氨丙基硅膠和δ-葡萄糖酸內(nèi)酯鍵合硅膠中，各個溶質(zhì)表現(xiàn)出不同的變化趨勢。用Van't Hoff作圖法，分析了溶質(zhì)在三種固定相