生物樣品及中藥制劑中中藥活性成分的聯(lián)用色譜分析.pdf

1、中醫(yī)藥是中華民族一個(gè)偉大的寶庫。當(dāng)今世界在回歸自然思潮的影響下，許多國家尋找天然藥物的呼聲日漸高漲，而中藥以其豐富的資源、獨(dú)特的療效、毒副作用少等特點(diǎn)，已引起世界各國的關(guān)注。尤其是近年來西方發(fā)達(dá)國家醫(yī)藥市場(chǎng)逐漸接受天然藥物，這給我國的中藥現(xiàn)代化發(fā)展提供了前所未有的機(jī)遇。中藥質(zhì)量控制和中藥藥代動(dòng)力學(xué)研究是中藥現(xiàn)代化的兩個(gè)主要方面。因此采用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)闡明其有效成分和作用機(jī)理，掌握其在體內(nèi)吸收、分布、代謝和排泄過程的特點(diǎn)，用可靠的科學(xué)數(shù)據(jù)來

2、評(píng)價(jià)和監(jiān)控中藥的內(nèi)在質(zhì)量，保證中藥用藥安全和有效，改善中藥科技含量過低，是當(dāng)前的首要任務(wù)。聯(lián)用色譜技術(shù)是從聯(lián)用技術(shù)入手，通過有效的利用色譜，光譜或質(zhì)譜提供的聯(lián)合信息，從而建立起對(duì)中藥和生物體液等復(fù)雜體系快速、準(zhǔn)確、可靠、靈敏的分析方法。因此，基于目前的色譜開發(fā)平臺(tái)，我們開展了如下創(chuàng)新性的研究： (1)基于陽離子表面活性劑CTAB在濃度低于CMC時(shí)吸附在二氧化硅包裹的磁性納米顆粒上形成混合膠束，我們采用了這種CTAB-SiO2/F

3、e3O4混合膠束作為納米萃取固定相萃取和富集生物樣品中的化合物。以中藥大黃的主要活性物質(zhì)為例，用HPLC/FLD方法檢測(cè)血清，尿液中的大黃酸和大黃素?？疾炝酥饕蛩厝绫砻婊钚詣┑臐舛?、磁性納米顆粒的量、吸附時(shí)間及解吸附條件等對(duì)萃取效率的影響。結(jié)果顯示，該方法準(zhǔn)確度、靈敏度高，大黃酸和大黃素的檢測(cè)下限低，在尿液中分別為0.2 ng/mL和0.5 ng/mL，血清中分別為7 ng/mL和10 ng/mL。也獲得了較滿意的回收率(92.76％

4、-109.90％)。 (2)建立了一種簡(jiǎn)單、快速、靈敏的膠束液相色譜方法(MLC)直接檢測(cè)中藥制劑和生物樣品中的隱丹參酮(CT)和丹參酮IIA(TS)。CT和TS為中藥丹參中主要活性成分，因它們具有強(qiáng)而廣的藥理作用得到大家的廣泛關(guān)注。MLC以pH為5的0.15 M SDS-8％正丁醇溶液作流動(dòng)相，在分析生物樣品時(shí)不需要任何的樣品前處理，相對(duì)傳統(tǒng)的樣品前處理方法如蛋白質(zhì)沉淀，液液萃取等，節(jié)省了大量的人力物力。實(shí)驗(yàn)中蛋白質(zhì)及內(nèi)源性物

5、質(zhì)對(duì)實(shí)驗(yàn)分析無任何干擾和影響。且這種流動(dòng)相相對(duì)于傳統(tǒng)的高效液相色譜水，有機(jī)溶劑流動(dòng)相更為綠色，說明MLC又是一種環(huán)境友好的分析方法。該方法獲得了好的線性關(guān)系( r2>0.998)，準(zhǔn)確度、精確度好，回收率高(CT和TS分別處于96.97％-101.86％和97.48％-103.14％之間)。為中藥丹參及制劑中活性成分的藥理，藥代動(dòng)力學(xué)研究提供了簡(jiǎn)單可靠的檢測(cè)方法。 (3)基于磁性納米粒子易于分離并且是優(yōu)秀的微波輻射吸收劑，我們以

6、磁性納米粒子作為固體媒介吸收微波能量，建立了新型的磁性納米粒子.微波協(xié)助萃取的方法，用于中藥中活性成分的快速有效的提取。以中藥黃芩為例，比較了加入磁性納米顆粒-微波萃取與傳統(tǒng)的微波萃取的提取效果，結(jié)果表明，在有磁性納米顆粒時(shí)，微波萃取不僅時(shí)間縮短(60 s→40 s)，并且萃取所需的有機(jī)溶劑含量少，萃取效率更高。以柚皮甙作為內(nèi)標(biāo)，萃取液通過HPLC-ESI/MS聯(lián)用技術(shù)定性定量分析，回收率在97.6-104.1％之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于2