人工冬蟲夏草不同部位有效成分分析及其多糖抗肝損傷作用.pdf

1、目的:研究湖南益康公司培育的人工冬蟲夏草不同部位(子實(shí)體、菌絲體和固體培養(yǎng)基)中有效成分(多糖、核苷類、氨基酸)的含量和組分差別,并初步考察了其多糖對(duì)小鼠CCl4肝損傷的保護(hù)作用,旨在為進(jìn)一步開發(fā)利用人工蟲草資源提供有價(jià)值的參考。
　　 方法:
　　 (1)采用水提醇沉法分別提取人工蟲草子實(shí)體、菌絲體、固體培養(yǎng)基干品,石油醚脫脂,sevag法除蛋白,活性炭脫色,得總多糖,UV測(cè)定蟲草不同部位總多糖含量。
　　 (

2、2)總多糖經(jīng)DEAE-52離子柱和Sephadex G-100凝膠柱分離純化后得精多糖,HPLC—ELSD測(cè)定精多糖重均分子量。
　　 (3)提取人工蟲草不同部位中的核苷類物質(zhì),RP—HPLC測(cè)定蟲草素、腺苷和腺嘌呤的含量。
　　 (4)采用L-8800氨基酸分析儀,以茚三酮為衍生試劑,柱后衍生法測(cè)定人工蟲草不同部位中氨基酸含量。
　　 (5)初步研究人工蟲草不同部位多糖對(duì)小鼠CCl4肝損傷的保護(hù)作用。建立小鼠肝

3、損傷模型,給藥一周后,UV測(cè)定肝指標(biāo)系數(shù)變化,并對(duì)肝細(xì)胞的組織形態(tài)學(xué)進(jìn)行觀察。
　　 結(jié)果:
　　 (1)蟲草子實(shí)體、菌絲體、固體培養(yǎng)基總多糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為10.40％、4.73％、1.86％。
　　 (2)HPLC測(cè)定蟲草多糖,其重均分子量在5000～70000范圍內(nèi),方法線性良好。測(cè)得子實(shí)體多糖分子量為49597、菌絲體多糖分子量為15002；固體培養(yǎng)基含有三種多糖,分子量分別為30521、5980、4453

4、。
　　 (3)人工蟲草子實(shí)體、菌絲體和固體培養(yǎng)基中腺嘌呤含量(μg·g-1)分別為197.29、144.05、70.08；腺苷分別為1302.52、635.02、171.73；蟲草素分別為1356.92、1101.04、350.96。
　　 (4)人工蟲草固體培養(yǎng)基、子實(shí)體、菌絲體中都含有十七種氨基酸,總氨基酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為8.32％、21.68％和23.19％。且都含有八種必需氨基酸,質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為3.74％、8.1

5、1％和8.88％。
　　 (5)不同部位蟲草多糖具有顯著地抑制CCl4引起的小鼠血清ALT、AST及肝臟MDA含量的升高,以及肝臟SOD含量的降低,并能顯著地減輕CCl4引起的肝小葉內(nèi)的灶性壞死。
　　 結(jié)論:
　　 (1)人工蟲草菌絲體和固體培養(yǎng)基中都含有一定量(多糖、氨基酸、核苷類)有效成分。
　　 (2)蟲草子實(shí)體、菌絲體和固體培養(yǎng)基多糖組對(duì)小鼠CCl4肝損傷具有顯著的保護(hù)作用,但三組之間未見明顯差