三七及其有效成分抗內(nèi)毒素致兔DIC癥作用研究.pdf

1、三七為五加科多年生人參屬植物三七Panax notoginseng(Burk)F.H.Chen的干燥根，是我國傳統(tǒng)的活血類藥物，其生品能夠化瘀止血，消腫定痛，在臨床上主要用于咯血、跌打腫痛、外傷出血等；而熟品則能補氣和血，用于失血過多、貧血等。隨著科技的不斷發(fā)展，對三七的現(xiàn)代藥理作用及其機制的研究也不斷深入，發(fā)現(xiàn)三七除了具有上述作用外，還具有保護心肌、抗冠心病、抗炎、抗衰老、抗氧化、抗自由基損傷、抗內(nèi)毒素等作用。為了能更充分的利用和開發(fā)

2、中藥三七的藥用價值，本課題主要研究三七及其有效成分的提取、鑒定、制劑制備和抗內(nèi)毒素致兔DIC癥的作用。
　　 第一，分別通過優(yōu)化正丁醇法提取三七素和丙酮-乙醚法提取三七總皂苷的提取工藝，得出最佳的提取流程。將提取的三七素、三七總皂苷和三七水煎液制備成注射液并進行質(zhì)量研究。結(jié)果表明，三七素的最佳提取工藝為甲醇滲淋24h、甲醇量為800ml、飽和正丁醇萃取5次；三七總皂苷的最佳提取工藝為90％乙醇回流提取2次，每次90min，丙酮、

3、乙醚比例1:1。三七素注射液為無色澄明液體，PH7.2，有效成分三七素含量為100mg/ml；三七總皂苷注射液為淡黃色澄明液體，PH7.4，三七總皂苷含量為100mg/ml；三七注射液為淡黃色澄明液體，PH為7.2，三七生藥含量為1.0g/ml。
　　 第二，通過體外抑菌試驗和抗內(nèi)毒素試驗結(jié)果表明，三七及其有效成分均有一定體外抑菌作用，三七和三七總皂苷具有體外抗內(nèi)毒素作用，三七素在體外不具有抗內(nèi)毒素作用。通過建立細菌內(nèi)毒素致兔D

4、IC癥模型，用三七及其有效成分制劑進行治療判定其療效。試驗結(jié)果顯示，三七及三七總皂苷能有效改善內(nèi)毒素引起的兔部分血液生理指標(biāo)的改變，降低兔血漿中內(nèi)毒素含量，增加抗凝血酶活性。能有效防治內(nèi)毒素所致兔心血管的損傷，肌肉出血等，其中三七總皂苷注射液療效最佳。
　　 第三，通過培養(yǎng)血管內(nèi)皮細胞，傳至第三代開始試驗。測定三七及三七總皂苷對內(nèi)毒素損傷的血管內(nèi)皮細胞的細胞活力及內(nèi)皮細胞中總蛋白含量、纖溶酶原激活物抑制劑1(PAI-1)和組織因

5、子(TF)活力。探討三七及三七總皂苷可能的抗內(nèi)毒素作用機制。試驗結(jié)果表明，細菌內(nèi)毒素能引起血管內(nèi)皮細胞的損傷，導(dǎo)致總蛋白含量的減少，PAI-1蛋白和TF活性的顯著增強；加入三七及三七總皂苷后，血管內(nèi)皮細胞的細胞活力明顯增加，總蛋白含量增多，PAI-1蛋白和TF活性降低，且藥物對內(nèi)皮細胞的作用呈劑量依賴關(guān)系。
　　 綜上所述，三七有效成分三七總皂苷能抑制大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和沙門氏菌的生長；明顯降低血漿中內(nèi)毒素含量、增加抗凝血