定量檢測(cè)端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶mRNA在肝癌中的表達(dá)水平及其對(duì)預(yù)后的影響.pdf

1、背景與目的 原發(fā)性肝癌(Primary liver cancer，PLC)是中國(guó)最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，在腫瘤死亡原因中占第2位。目前，手術(shù)切除仍然是肝癌首選的治療手段，但是即使是根治性切除，其術(shù)后復(fù)發(fā)率仍很高，生存率仍較低。如何判斷肝癌預(yù)后是目前亟需解決的問(wèn)題。肝癌預(yù)后的判斷在于判斷肝癌的生物學(xué)特性。研究表明端粒酶與惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展有密切關(guān)系。端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(human telomerase reverse transcript

2、ase，hTERT)是端粒酶合成的限速酶，其表達(dá)與端粒酶活性呈正相關(guān)。研究表明，端粒酶表達(dá)陽(yáng)性的惡性腫瘤預(yù)后差。hTERTmRNA的檢測(cè)方法較端粒酶活性檢測(cè)方便且精確。目前在肝癌中定量檢測(cè)hTERTmRNA的報(bào)道較少見(jiàn)，本研究采用熒光定量逆轉(zhuǎn)錄PCR技術(shù)結(jié)合Taqman MGB probe技術(shù)，利用絕對(duì)定量的方法研究肝癌及癌旁組織中hTERTmRNA的表達(dá)，探討定量檢測(cè)hTERT mRNA水平與肝癌術(shù)后復(fù)發(fā)與長(zhǎng)期生存的關(guān)系。 方

3、法： 選取中山大學(xué)腫瘤防治中心2002年1月～2003年12月間手術(shù)切除的術(shù)后病理確診為肝細(xì)胞癌的30例病例的肝癌組織和癌旁組織，用實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄PCR技術(shù)結(jié)合Taqman MGB探針?lè)ǘ繖z測(cè)其hTERTmRNA的表達(dá)水平，利用統(tǒng)計(jì)學(xué)分析其與肝癌術(shù)后復(fù)發(fā)與長(zhǎng)期的關(guān)系。 結(jié)果： hTERTmRNA在肝癌和癌旁組織中均可探測(cè)到表達(dá)，hTERT mRNA在癌組織中表達(dá)的中位數(shù)為523(3.5～9220)copie

4、s/ug；在癌旁組織中表達(dá)的中位數(shù)為153(12.9～1760)copies/ug。hTERTmRNA在癌組織和癌旁組織中的配對(duì)檢驗(yàn)具有顯著差異，hTERTmRNA在肝癌組織中的表達(dá)明顯高于癌旁組織的表達(dá)(z=-4.001，p<0.0001)；hTERTmRNA在肝癌組織和癌旁組織中的表達(dá)與性別、年齡、乙肝病毒感染、病理分級(jí)無(wú)明顯相關(guān)性；hTERTmRNA在1年內(nèi)復(fù)發(fā)的病例與1年內(nèi)未復(fù)發(fā)的病例的肝癌組織的配對(duì)檢驗(yàn)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(z=-1.

5、420，p=0.158)；hTERTmRNA在1年內(nèi)復(fù)發(fā)的病例的癌旁組織中的表達(dá)比1年未復(fù)發(fā)的病例的癌旁組織中的表達(dá)高，且有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(z=-2,518，p=0.011)：3年生存的患者與死亡的患者間癌和癌旁hTERTmRNA的表達(dá)水平?jīng)]有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。 結(jié)論： 熒光定量逆轉(zhuǎn)錄PCR法一種敏感有效的檢測(cè)hTERTmRNA的方法；hTERTmRNA在肝癌組織中表達(dá)較癌旁組織中的表達(dá)明顯高；hTERT