液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)應(yīng)用于小柴胡湯藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究.pdf

1、本文采用高效液相色譜飛行時(shí)間質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，建立了快速鑒別小柴胡湯中化學(xué)成分的分析方法。同時(shí)建立了中藥復(fù)方小柴胡湯的化學(xué)成分?jǐn)?shù)據(jù)庫(kù)，其中收納了小柴胡湯中七味藥材已知的化學(xué)成分400多個(gè)，并計(jì)算出其精確分子量，其中包括皂苷類成分，如柴胡皂苷和甘草皂苷；黃酮類成分如黃芩苷、漢黃芩苷和甘草甘；生物堿類成分，如麻黃堿；以及二苯庚烷類和姜辣素類等成分。在小柴胡湯總離子流圖中，共鑒別出38個(gè)化合物，其中鑒別出甘草中化學(xué)成分17個(gè)、黃芩中化學(xué)成分10個(gè)

2、、人參中化學(xué)成分4個(gè)、柴胡中化學(xué)成分4個(gè)、生姜中化學(xué)成分3個(gè)，半夏和大棗未檢出。從小柴胡湯的定性結(jié)果可以看出，小柴胡湯中含有多種化學(xué)成分，其中含量最高的為黃酮類化學(xué)成分，主要來(lái)自于黃芩和甘草，在液相色譜上較早出峰。皂苷類成分也是小柴胡湯中重要的化學(xué)成分，可能由于其極性較小的緣故，在液相色譜中較后出峰。這些成分在小柴胡湯中的含量較高，且為生物活性物質(zhì)，可為小柴胡湯藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究奠定基礎(chǔ)。 2005年版中國(guó)藥典中以黃芩苷的含量作為

3、小柴胡顆粒質(zhì)量控制的標(biāo)準(zhǔn)。由于有較好的紫外吸收，黃酮類化合物的含量測(cè)定多采用紫外檢測(cè)器。小柴胡湯中黃芩苷、漢黃芩苷含量較高，其含量的多少對(duì)小柴胡湯質(zhì)量影響顯著。本文用回流提取的方法，按照原方比例制備小柴胡湯。采用高效液相色譜紫外檢測(cè)器，Agilent Zorbax XDB-C18(150mm×4.6mm，5μm)色譜柱，流動(dòng)相為乙腈-水系統(tǒng)，對(duì)小柴胡湯中黃芩苷、漢黃芩苷進(jìn)行含量測(cè)定。與藥典相比，增加了對(duì)漢黃芩苷的測(cè)定。本方法可以用于不同

4、制劑小柴胡湯的質(zhì)量控制研究，也為藥物代謝及藥物動(dòng)力學(xué)研究奠定基礎(chǔ)。 多數(shù)中藥以湯劑的形式口服給藥。實(shí)際上，這種傳統(tǒng)復(fù)方在發(fā)揮藥效作用之前，除了在炮制、煎煮過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生動(dòng)態(tài)變化外，進(jìn)入機(jī)體后亦要發(fā)生動(dòng)態(tài)變化。本文采用HPLC-MS方法測(cè)定口服給藥小柴胡湯后，大鼠血漿中黃芩苷和漢黃芩苷的含量，所建立含量測(cè)定方法簡(jiǎn)便可靠，血漿中內(nèi)源性物質(zhì)均不干擾樣品峰，方法學(xué)驗(yàn)證結(jié)果表明該含量測(cè)定方法適合于生物樣品中黃芩苷和漢黃芩苷的含量測(cè)定。該方法