黃芪葛根湯的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  闡明黃芪葛根湯抗糖尿病腎病的藥效物質(zhì)基礎(chǔ),建立黃芪葛根湯譜效結(jié)合的指紋圖譜。
  方法:
  采用系膜細(xì)胞與巨噬細(xì)胞共培養(yǎng)的Transwell模型,觀察黃芪葛根湯對(duì)AGEs誘導(dǎo)的系膜細(xì)胞炎癥的抑制作用,研究其抗炎活性。采用高效液相對(duì)黃芪葛根湯提取液進(jìn)行分析,對(duì)色譜條件(包括檢測(cè)波長、流動(dòng)相、色譜柱、洗脫梯度等)進(jìn)行了優(yōu)化,建立黃芪葛根湯的指紋圖譜,并按照《中藥注射劑指紋圖譜研究的技術(shù)要求》的要求,應(yīng)用“中藥

2、色譜指紋圖譜相似性評(píng)價(jià)系統(tǒng)2004A版”對(duì)指紋圖譜進(jìn)行相似度評(píng)價(jià)以及專屬性、精密度、重復(fù)性和穩(wěn)定性等方法學(xué)考察。以大鼠腎小球系膜細(xì)胞為固相化材料,與HPLC指紋圖譜聯(lián)用,優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,包括樣品前處理、未結(jié)合成分的洗脫次數(shù)等,建立系膜細(xì)胞固相化模型,通過已建立的抗炎細(xì)胞模型對(duì)篩選出來的藥效物質(zhì)進(jìn)行藥效學(xué)驗(yàn)證。采用HPLC指紋圖譜與ESI-MS聯(lián)用,對(duì)細(xì)胞膜固相化中的未結(jié)合成份、膜上的結(jié)合成分和細(xì)胞內(nèi)成分進(jìn)行指紋圖譜、質(zhì)譜數(shù)據(jù)的分析和鑒定,

3、解析系膜細(xì)胞相結(jié)合的藥效物質(zhì)結(jié)構(gòu)。
  結(jié)果:
  黃芪葛根湯高、中、低劑量組對(duì)AGEs誘導(dǎo)的系膜細(xì)胞炎癥有顯著的抑制作用,且顯示出一定的量效關(guān)系。黃芪葛根湯的指紋圖譜條件專屬性、重復(fù)性、精密度和穩(wěn)定性良好,10個(gè)批次提取液間的指紋圖譜相似度均高于0.97,均符合要求,適用于黃芪葛根湯的質(zhì)量控制。藥效學(xué)研究表明,10倍量細(xì)胞破碎液對(duì)系膜細(xì)胞炎癥模型具有顯著的抑制作用,表明采用細(xì)胞固相化可以篩選出黃芪葛根湯中具有抗炎活性的藥效

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