復方“龍芪”多組分自微乳給藥系統(tǒng)的研究.pdf

1、本研究以“龍芪方”為模型藥物，選擇自微乳給藥系統(tǒng)(SMEDDS)為給藥載體，進行復方多組分SMEDDS的研究。
　　 “龍芪方”為臨床抗癌驗方，主要用于治療腫瘤疾病，藥理學研究表明，龍葵中的甾體類生物堿、黃芪中的皂苷類成分及白花蛇舌草的脂溶性三萜類成分是該復方的有效組分，本實驗研究顯示，這些成分的水溶性不太好。而自微乳給藥系統(tǒng)(SMEDDS)是水難溶性藥物的理想載體，因此本復方有效組制備成SMEDDS是一種很好的選擇。而目前，有

2、關中藥單體成分被制備成SMEDDS形式的研究已經(jīng)很多，但是中藥復方多組分研究卻很少，而研究復方多組分SMEDDS更符合中醫(yī)臨床用藥習慣，也更能發(fā)揮中藥的臨床療效。因此本研究選擇“龍芪方”為模型藥物，探討多組分SMEDDS處方和制備工藝，具體研究內(nèi)容如下：
　　 1、“龍芪方”物質(zhì)基礎研究
　　 “龍芪方”由龍葵、黃芪和白花蛇舌草三味中藥組成，龍葵是本復方的君藥。藥理研究表明，龍葵中的甾體生物堿類組分是其抗腫瘤的主要有效組

3、分。本研究建立了龍葵藥材中澳洲茄堿HPLC的含量分析方法。采用正交實驗法，以澳洲茄堿和浸膏收率為指標，優(yōu)選了龍葵總生物堿的提取條件，篩選出最佳提取條件為：以含有5％醋酸-55％乙醇(v/v)溶液，水浴回流提取3次，每次加8倍量，提取60min為佳。黃芪皂苷類是黃芪中具有抗腫瘤作用的主要活性成分，本文考察了黃芪中皂苷類成分的提取，結(jié)果表明，藥材加70％乙醇回流提取2次，每次1.5小時，第一次加8倍量，第二次加6倍量提取效果較好。白花蛇舌草

4、中三萜類組分的抗瘤活性較強，本實驗在建立白花蛇舌草中指標性分析方法的基礎上，以熊果酸為指標對白花蛇舌草中的三萜酸類成分進行了提取，結(jié)果表明，用95％乙醇8倍量體積，提取2次，每次1.5h效果較好。
　　 2、空白自微乳體系的研究
　　 以偽三元相圖、微乳區(qū)域、增容水量為指標研究了：以Tween-20-OP乳化劑為主要表面活性劑的體系和以豆磷脂為主要表面活性劑的空白自微乳體系，為處方篩選打下了基礎。
　　 3、單因

5、素和正交實驗相結(jié)合優(yōu)選“龍芪方”單組分及多組分SMEDDS處方
　　 選擇和乳劑粒徑密切相關的透光率為主要指標，通過單因素和正交實驗相結(jié)合的方法篩選了龍葵總生物堿和黃芪總皂苷單味藥有效組分SMEDDS的處方。實驗結(jié)果表明，龍葵總生物堿SMEDDS的最佳處方為：OP乳化劑100mg、Tween20150mg、油酸50mg、1，2-丙二醇500mg、龍葵總生物堿提取物13mg，該處方的載藥量為1.60％；黃芪總皂苷SMEDDS的最佳

6、處方為：OP乳化劑200mg、Tween20250mg、1，2-丙二醇300mg、油酸70mg、黃芪總皂苷提取物10mg、該處方的載藥量為1.2％。研究了“龍葵-黃芪”兩組分及“龍芪方”多組分SEMDDS處方，最終確定多組分SMEDDS的最佳處方為：OP乳化劑100mg、Tween20300mg、1，2-丙二醇500mg、油酸50mg、龍葵總生物堿25mg、黃芪總皂苷25mg、白花蛇舌草有效成分25mg，該處方的總載藥量達到7.3％。<

7、br>　　 4、建立了“龍芪方”SMEDDS質(zhì)量控制標準
　　 質(zhì)量控制是制劑臨床療效的重要保證。本研究采用HPLC法建立了SMEDDS中三種甾體類生物堿的測定方法并檢測其中澳洲茄堿、澳洲茄邊堿及Khasianine的含量。實驗結(jié)果表明，四批“龍芪方”多組分SMEDDS三種生物堿的含量分別為：0.6120、0.5045、0.4986mg·mL-1，0.6195、0.5605、0.5003mg·mL-1，0.7950、0.757

8、5、0.5053mg·mL-1，0.6270、0.5253、0.4998mg·mL-1。使用馬爾文粒徑測定儀檢測了所制備的SMEDDS乳化后的粒徑，Zeta電位，結(jié)果表明龍葵總生物堿、黃芪總皂苷、龍葵-黃芪兩組分及“龍芪方”多組分SMEDDS乳化后的粒徑分別為61.8、48.1、53.1、99.3nm，Zeta電位分別為-4.9、3.1、-2.8、-2.9mv。實驗還考察了所制備的SMEDDS在室溫及恒溫恒濕穩(wěn)定箱中的穩(wěn)定性，結(jié)果表明濃

9、縮乳無論在室溫還是在加速條件下均較穩(wěn)定，乳化后的微乳制劑在1個月內(nèi)基本穩(wěn)定。
　　 5、藥效學初步研究
　　 選擇S180腫瘤小鼠為實驗動物模型，對復方SMEDDS的藥效學進行了相應的初步考察。實驗結(jié)果初步顯示，實驗組和環(huán)磷酰胺組瘤重明顯低于模型對照組，低、中、高劑量組抑瘤率分別為39.03％，47.49％，47.01％，與模型對照組比較，抑瘤率均有非常顯著性差異(P＜0.01)。復方SMEDDS各劑量組小鼠體重變化與模