復(fù)方多組分內(nèi)耳給藥新模式：納米粒及納米粒-溫敏凝膠雙相釋藥系統(tǒng)的研究.pdf

1、世界衛(wèi)生組織2013年報(bào)告稱，全球有3.6億人患有聽力殘疾，占全球總?cè)丝诘?.3％。對于70歲及以上的人群，近三分之二患有老年性聾疾病。這可能會(huì)導(dǎo)致社會(huì)孤立和主要的溝通障礙，嚴(yán)重影響患者的正常生活。經(jīng)鼓室注射(IT)的局部治療方式已成為目前治療內(nèi)耳疾病的新方法之一，其可以減小用藥劑量與藥物的不良反應(yīng)，且便捷、安全和微創(chuàng)，但由于中耳腔的容積較大且存在咽鼓管這一自然瀉出通道，實(shí)際與圓窗膜接觸，以及經(jīng)由圓窗膜擴(kuò)散進(jìn)入內(nèi)耳的藥物總量十分有限或并

2、不十分確切。溫敏原位凝膠能隨環(huán)境溫度改變而發(fā)生一定的相變?？蓪?shí)現(xiàn)注射植入和長期釋藥，廣泛應(yīng)用于眼部給藥、鼻部給藥以及注射給藥，在藥學(xué)領(lǐng)域中發(fā)揮著重要的作用，成為近年來的研究熱點(diǎn)。藥物在溫敏凝膠劑中的緩釋特征明顯，有望成為一種新型的內(nèi)耳局部給藥系統(tǒng)。隨著溫敏凝膠研究的不斷深入，已有研究將溫敏凝膠和納米粒、脂質(zhì)體和微球等結(jié)合起來，使所得到的復(fù)合給藥系統(tǒng)可以充分發(fā)揮兩者的優(yōu)勢，克服單一制劑的不足，提高藥物的溶解度和穩(wěn)定性，達(dá)到更好的緩、控釋效

3、果。丹參、三七是中國傳統(tǒng)古方常用的中藥藥對之一，均有活血化瘀理氣止痛之功效，配伍后相須互補(bǔ)，廣泛用于治療突發(fā)性耳聾及噪聲性聽力損傷等內(nèi)耳疾病。
　　本課題以丹參-三七復(fù)方有效組分三七皂苷R1(R1)、人參皂苷Rg1(Rg1)、人參皂苷Rb1(Rb1)、丹酚酸B(Sal B)和丹參酮IIA(Ts IIA)作為模型藥物，以生物相容性好的PLGA為藥物載體，采用復(fù)乳-溶劑揮發(fā)法(W/O/W)制備PLGA納米粒，且以納米粒的粒徑、粒徑分布

4、(PDI)、包封率和載藥量為評價(jià)指標(biāo)，采用單因素法進(jìn)行處方優(yōu)化。為提高丹參酮IIA(TS IIA)的溶解度，采用旋蒸法制備丹參酮IIA的羥丙基-β-環(huán)糊精包合物(TS IIA-HP-β-CyD)，與PLGA納米粒共孵育，制備成核-殼型丹參酮IIA-羥丙基-β-環(huán)糊精包合物-PLGA納米粒(HP-β-CyD-PLGA NPs)。激光粒度儀測得HP-β-CyD-PLGA NPs的平均粒徑為234.12±4.83nm，PDI為0.12±0.0

5、2，Zeta電位為44.42±4.13mV。超濾離心法測定各組分R1、Rg1、Rb1、Sal B和TS IIA的包封率分別為：78.97±6.39%，85.22±5.95%，85.64±8.23%，76.59±9.19%和94.70±2.56%；載藥量分別為：0.37±7.24%，0.27±5.86%，0.54±9.12%，0.33±12.39%和0.23±8.34%。透射電鏡(TEM)顯示HP-β-CyD-PLGA NPs具有明顯的核

6、殼結(jié)構(gòu)，為較圓整的球形且分布均一。采用透析袋法研究HP-β-CyD-PLGA NP s的體外釋藥，釋藥曲線方程擬合結(jié)果表明R1、Rb1和Sal B的釋藥過程符合一級釋放動(dòng)力學(xué)模型，Rg1的釋藥過程符合Higuchi模型，TS IIA的釋藥過程符合Ritger-Peppas模型。
　　分別選用泊洛沙姆和殼聚糖為溫敏凝膠主要基質(zhì)材料，將HP-β-CyD- PLGA NPs分散于兩種溫敏凝膠中，形成納米粒-凝膠雙相釋藥系統(tǒng)。試管倒置法顯

7、示載納米粒的兩種溫敏凝膠在37℃均具有良好的溫敏性能。載納米粒的泊洛沙姆凝膠(HP-β-CyD-PLGA-NPs-P-gel)體外釋藥研究表明，各成分釋放均呈現(xiàn)顯著地緩釋效應(yīng)，R1、Rb1及TS IIA的釋放符合Ritger-Peppas模型，Rg1和Sal B的釋放符合Higuchi模型，釋放機(jī)制均是溶蝕和擴(kuò)散的共同作用。掃描電鏡顯示載納米粒的殼聚糖凝膠(HP-β-CyD-PLGA-NPs-CS/GP-gel)內(nèi)部呈三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，且成

8、功包載納米粒。體外釋放研究表明 HP-β-CyD-PLGA-NPs-CS/GP-gel中各組分釋放也都符合溶蝕-擴(kuò)散動(dòng)力學(xué)模型，Rg1的釋放符合Higuchi模型，其余四中成分均符合Ritger-Peppas模型。此外，在溶菌酶存在的PBS溶液中，凝膠具有良好的降解性能。
　　在豚鼠實(shí)驗(yàn)中，考察了共載羅丹明 B和香豆素6熒光素的納米粒(C-6-HP-β-CyD-R-B-PLGA NPs)、納米粒-泊洛沙姆凝膠(C-6-HP-β-C

9、yD-R-B-PLGA-NPs-P-gel)及納米粒-殼聚糖凝膠(C-6-HP-β-CyD-R-B-PLGA-NPs- CS/GP-gel)在耳蝸Corti器(OC)、螺旋神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(SGNs)和血管紋(SV)的分布情況，同時(shí)也考察了丹參-三七復(fù)方組分各給藥系統(tǒng)經(jīng)豚鼠鼓室注射在內(nèi)耳外淋巴中(PL)的藥物分布及藥動(dòng)學(xué)研究。結(jié)果表明，納米粒、納米粒-泊洛沙姆凝膠及納米粒-殼聚糖凝膠給藥系統(tǒng)均能成功地將藥物遞送進(jìn)入耳蝸PL，且在OC、SGNs

10、及SV均有分布。納米粒-凝膠復(fù)合給藥系統(tǒng)能夠延長藥物的釋放時(shí)間達(dá)96h，同時(shí)藥動(dòng)學(xué)參數(shù)顯示其能夠延長藥物在豚鼠PL中的平均滯留時(shí)間(MRT)，以及提高TS IIA的生物利用度(AUC)。
　　綜上所述，復(fù)方組分納米粒-凝膠雙相釋藥系統(tǒng)兼具納米粒與凝膠的性質(zhì)，以液體的形式經(jīng)鼓室給藥后，可在中耳腔內(nèi)發(fā)生相轉(zhuǎn)變，形成半固體凝膠，使藥物與圓窗膜的接觸時(shí)間延長，達(dá)到緩釋效果，提高局部生物利用度，從而減少給藥次數(shù)、克服液體制劑需多次給藥的缺陷