卡鉑對(duì)肺腺癌A549細(xì)胞株放射增敏作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、肺癌是最常見的惡性腫瘤之一,是一種嚴(yán)重威脅人類健康的疾病。放射治療是臨床上常用的治療手段,為了增加腫瘤細(xì)胞對(duì)放射線的敏感性,尋找最佳放射增敏劑是非常重要的工作。因此,本實(shí)驗(yàn)以A549細(xì)胞株為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,研究了臨床上常用的化療藥物卡鉑對(duì)A549細(xì)胞的放射增敏作用。
　　 方法：
　　 1細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)所用的細(xì)胞為A549細(xì)胞,所有實(shí)驗(yàn)都在條件為溫度37±0.3℃、相對(duì)濕度≥95％、CO2濃度5±0.1％的細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。

2、r>　　 2實(shí)驗(yàn)方法應(yīng)用MTT比色法、生長(zhǎng)曲線法觀察卡鉑對(duì)A549細(xì)胞增殖能力的影響。用平板克隆培養(yǎng)法觀察A549細(xì)胞在不同的實(shí)驗(yàn)分組的條件下的克隆增殖能了,并觀察形態(tài)學(xué)差異。用流式細(xì)胞儀測(cè)定細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡。用Transwell侵襲小室觀察了A549細(xì)胞在不同實(shí)驗(yàn)條件下的侵襲能力的變化。
　　 結(jié)果：
　　 1卡鉑對(duì)A549細(xì)胞的增殖能力的影響
　　 MTT比色法的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,卡鉑對(duì)A549細(xì)胞的IC50

3、、IC20分別為13.22μg／ml、3.29μg／ml。然后分別取IC20附近的三個(gè)濃度1μg／ml、3μg／ml、5μg／ml作細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線,結(jié)果顯示3μg／ml的濃度最接近IC20顯示了它在3天時(shí)間內(nèi)對(duì)細(xì)胞沒有毒性,可以用這個(gè)濃度做放療增敏實(shí)驗(yàn)。
　　 2卡鉑對(duì)A549細(xì)胞的放射敏感性的影響
　　 2.1對(duì)克隆能力的影響從多靶單擊模型參數(shù)分析,3μg／ml濃度的卡鉑處理A549細(xì)胞后對(duì)放射線最敏感,D0=1.41

4、；5μg／ml濃度的卡鉑處理細(xì)胞,藥物本身對(duì)細(xì)胞影響比較嚴(yán)重,因此增敏效果不好,D0=1.42;1μg／ml濃度的卡鉑處理細(xì)胞,由于藥物濃度太低,對(duì)放射增敏的效果不好,D0=1.70；對(duì)照組的D0=1.77。因此在接近IC20的濃度更能體現(xiàn)增敏劑的放射增敏作用。
　　 2.2對(duì)細(xì)胞周期的影響卡鉑處理細(xì)胞后照射組,增加了S期細(xì)胞對(duì)射線的敏感性,與對(duì)照組相比S期降低48.03％,這預(yù)示著腫瘤細(xì)胞的增殖能力降低。
　　 2.3

5、對(duì)細(xì)胞凋亡的影響對(duì)照組、照射組、給藥組、給藥照射組的凋亡率分別為14.51％、21.15％、19.02％、55.77％?？ㄣK處理細(xì)胞后照射組細(xì)胞的凋亡率是對(duì)照組的2.84倍。
　　 2.4對(duì)侵襲能力的影響對(duì)照組、照射組、給藥組、給藥照射組與對(duì)照組相比侵襲能力都有降低,且都有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。但是給藥照射組細(xì)胞的侵襲能力比其它各組都低,與對(duì)照組相比侵襲能力降低51.97％。
　　 3細(xì)胞形態(tài)學(xué)的變化平板克隆形成實(shí)驗(yàn)中,觀察到卡鉑

6、處理后放射組的細(xì)胞集落中有些細(xì)胞的胞漿中出現(xiàn)空泡,而對(duì)照組、單純給藥組、單純放射組卻觀察不到這種現(xiàn)象。
　　 結(jié)論：
　　 1.卡鉑對(duì)人腫腺癌A549細(xì)胞的增殖抑制在研究的濃度范圍內(nèi)呈濃度依賴性和時(shí)間依賴性,并有明顯的量效關(guān)系。
　　 2.A549細(xì)胞的克隆形成率與放射劑量呈負(fù)相關(guān),相同劑量下卡鉑+照射組的克隆形成率低于單純照射組。
　　 3.小劑量卡鉑可提高人肺腺癌A549細(xì)胞的放射敏感性,其作用機(jī)制可