黃體酮乳膏劑在Beagle犬體內(nèi)的藥動學研究.pdf

1、目的：建立超高效液相色譜-三重四極桿在線離子阱串聯(lián)質(zhì)譜法（UPLC-Qtrap）及超高效液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜法（UPLC-MS/MS）用于血漿中黃體酮濃度的測定，研究黃體酮乳膏劑與膠囊劑在體內(nèi)的藥物動力學和相對生物利用度。
　　 方法：1.取Beagle犬血漿樣品，加入適量內(nèi)標（炔諾酮），用液相萃取技術，經(jīng)超高效液相色譜分離，色譜柱：Agilent ZORBAX-SB C18分析柱（150mm×2.1mm，5μm），保護

2、柱：Agilent C18分析柱（10mm×2.1mm，5μm），流動相：甲醇-0.1%甲酸水溶液（90：10，V/V），流速0.2mL·min-1，采用UPLC-QtrapAPCI離子化-串聯(lián)質(zhì)譜多離子反應監(jiān)測（MRM）模式進行檢測，放電電流（NC）=3.00；霧化氣（GS1）=0.00；UPLC-Qtrap輔助氣（GS2）=50.00；氣簾氣（CUR）=30.00；溫度（TEM）=350.00，碰撞活化裂解（CAD）為Medium（

3、以上單位均為儀器單位），離子選擇通道分別為m/z 315.30/109.00（黃體酮）和m/z 299.30/109.10（內(nèi)標）。2. 取Beagle犬血漿樣品，加入適量內(nèi)標（炔諾酮），用液相萃取技術，經(jīng)超高效液相色譜分離，色譜柱：Waters SymmetryShieldTM RpC18分析柱（150mm×4.6mm，5μm），保護柱：Agilent C18分析柱（10mm×2.1mm，5μm），流動相：甲醇-0.1%甲酸水溶液（9

4、0：10，V/V），流速0.5mL·min-1，采用LC-MS/MS APCI離子化-串聯(lián)質(zhì)譜多離子反應監(jiān)測（MRM）模式進行檢測，放電電流（NC）=3.00；霧化氣（GS1）=35.00；氣簾氣（CUR）=15.00；溫度（TEM）=350.00，碰撞活化裂解（CAD）=5.0（以上單位均為儀器單位），離子選擇通道分別為m/z 315.30/109.00（黃體酮）和m/z 299.30/109.10（內(nèi)標）。3. 采用LC-MS/MS

5、法測定beagle犬血漿中黃體酮藥物濃度。用DAS程序計算藥物動力學參數(shù)。
　　 結(jié)果：1.UPLC-Qtrap測定黃體酮血漿濃度在0.5～25ng·mL-1范圍內(nèi)線性關系良好（r=0.9991），日內(nèi)和日間精密度試驗的RSD均小于7.5%，方法回收率為91.80%～100.66%，提取回收率為84.24%～91.53%，最低檢測限為0.2ng·mL-1；2. UPLC-MS/MS測定黃體酮血漿濃度在0.4～20ng·mL-1范