高脂飲食建立大鼠脂肪肝模型及超聲量化診斷.pdf

1、目的：通過高脂飲食建立大鼠不同程度脂肪肝模型，進(jìn)行超聲直方圖(Hist-B)測定，并結(jié)合生化檢查，探討具有病理基礎(chǔ)的脂肪肝無創(chuàng)性超聲定量診斷標(biāo)準(zhǔn)。 方法：選用雄性wister大鼠40只，正常喂養(yǎng)1周后，隨機(jī)分成對照組15只，普通飼料喂養(yǎng)；實(shí)驗(yàn)組25只，高脂飼料喂養(yǎng)，兩組均自由飲水。分別于4w、6w、8w、10w、12w各處死3只對照組大鼠和5只實(shí)驗(yàn)組大鼠。處死前隔夜禁食水，次日稱重后以10％水合氯醛(3-5ml/kg)腹腔注射麻

2、醉后，劍突下3cm上腹部脫毛，充分暴露腹部，取仰臥位固定，涂充足的藕合劑，使探頭與腹壁充分接觸，采用日本TOSHIBA 350A.彩色超聲診斷儀進(jìn)行肝臟超聲檢測，探頭頻率為3.75MHz，在相同條件下(增益為6/86，深度為6.0cm，分辨率及靈敏度固定，STC曲線調(diào)節(jié)鈕至于正中一直線)利用超聲直方圖(Hist-B)功能固定面積測量法進(jìn)行灰階值測定，不同深度取三個(gè)測試區(qū)域，取平均灰階值(M值)。取樣框內(nèi)避開可見的肝內(nèi)靜脈、門脈、膽管等組

3、織。每次行超聲直方圖功能檢測前，先用目測觀察法判斷是否有脂肪肝并進(jìn)行分度(診斷標(biāo)準(zhǔn)參考中華醫(yī)學(xué)會肝病學(xué)分會脂肪肝和酒精性肝病學(xué)組.非酒精性脂肪性肝病診療指南[J]肝臟，2006,11(1)：68-70.)。超聲檢測完成后，取心臟血處死，取出肝臟。肝臟稱濕重后用10％甲醛溶液固定48h進(jìn)行HE染色，切片后光鏡下觀察病理。心臟血離心后取血清，應(yīng)用日本日立7170-AHITAC全自動生化分析儀檢測丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移

4、酶(AST)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以均值土標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示，實(shí)驗(yàn)組各組間采用單因素方差分析，其余數(shù)據(jù)采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)比較，P＜0.05時(shí)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果：1 病理結(jié)果顯示，每只大鼠所取3處病理結(jié)果無差異。根據(jù)病理診斷標(biāo)準(zhǔn)，符合正常肝臟的大鼠15只；符合肝臟輕度脂肪變的大鼠7只；符合肝臟中度脂肪變的大鼠8只；符合肝臟重度脂肪變的大鼠10只。

5、 2.以病理結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，超聲直方圖平均灰階值測定法優(yōu)于肉眼觀察測定法。前者敏感度88％，特異度93％，準(zhǔn)確率90％；后者敏感度76％，特異度87％，準(zhǔn)確率80％。 3.體重變化情況在實(shí)驗(yàn)過程中，大鼠體重一直保持上升，但是各組之間沒有顯著性差別(P＞0.05)。實(shí)驗(yàn)組與對照組比較差異具有顯著性(P＜0.01)。 4 實(shí)驗(yàn)組與對照組超聲M值及生化指標(biāo)比較：實(shí)驗(yàn)組與對照組均有明顯差異(P＜0.05)。 5 各組超聲M

6、值比較： 輕度脂肪肝組(15.20±0.74)、中度脂肪肝組(24.38±2.17)、重度脂肪肝組(35.44±2.58)與正常對照組(7.99±0.65)相比，P＜0.05，有明顯差異。 6 超聲M值與血脂比較：M值與TG、TC在對照組、輕度脂肪肝、中度脂肪肝、重度脂肪肝組都呈升高趨勢，而HDL-C呈下降趨勢。 7 各組肝功能比較：對照組與輕度脂肪肝組ALT、AST有明顯差異(P＜0.05)，中度脂肪肝組、重度