生殖股神經生殖支移位海綿體神經修復大鼠神經源性勃起功能障礙的研究.pdf

1、本文分三個部分進行探討：
　　第一部分：生殖股神經生殖支移位海綿體神經重建勃起反射通路的研究
　　目的：探討生殖股神經生殖支移位海綿體神經后，再生神經形態(tài)學特點及新建立的勃起反射傳出通路的構成。
　　方法：將30只成年雄性Sprague-Dawley大鼠（約250-300g）隨機分為三組，每組10只，假手術組：僅顯露雙側生殖股神經及海綿體神經，不做離斷。損傷組：離斷雙側生殖股神經生殖支及海綿體神經，斷端以絲線結扎防止再

2、生。神經移位組：離斷雙側生殖股神經生殖支及海綿體神經后，雙側生殖股神經生殖支近端與海綿體神經遠端行端端吻合。術后12周，將熒光金溶液（Fluorogold，F(xiàn)G）分別注入各組大鼠右側陰莖腳內行神經逆行示蹤研究；再通過各組大鼠遠端海綿體神經半薄切片有髓神經纖維計數及電鏡觀察來評估神經再生情況，其中神經移位組大鼠吻合口段神經進一步行縱切面HE染色，以了解吻合口段神經的連續(xù)性。
　　結果：逆行神經示蹤發(fā)現(xiàn)：損傷組和神經移位組大鼠盆神經節(jié)

3、內僅見極少量的FG陽性神經元，其平均數量分別為6.3±3.4和5.4±2.9，遠少于假手術大鼠（106.7±15.9）；在各節(jié)段的脊髓切片中，假手術組和損傷組大鼠均未發(fā)現(xiàn)有FG陽性神經元存在，而神經移位組大鼠脊髓L1，L2前角內可見有FG陽性神經元，其平均數量分別為2.7±1.0，5.3±1.2。神經橫斷面半薄切片甲苯胺藍染色顯示：假手術組的海綿體神經和神經移位組的再生神經內均可見豐富藍染的有髓神經纖維，其數量分別為346.8±17.6

4、6和621.87±81.25，明顯高于損傷組遠端海綿體神經內有髓神經纖維的數量（16.68±6.08）（P<0.05）；超微電鏡進一步觀察到假手術組和神經移位組有大量有髓和無髓神經纖維存在，幾乎未見變性壞死的髓鞘；而損傷組可見髓鞘廣泛變性，膠原纖維大量增生。神經移位組大鼠吻合口段神經HE染色見生殖股神經生殖支可以通過吻合口長入海綿體神經。
　　結論：生殖股神經生殖支移位海綿體神經后，生殖股神經生殖支可以再生長入陰莖海綿體，并建立新

5、的勃起反射傳出神經通路（脊髓L1，L2前角運動神經元—生殖股神經生殖支—再生神經—陰莖海綿體）。
　　第二部分：生殖股神經生殖支移位海綿體神經后陰莖勃起功能的研究
　　目的：運用神經電生理學和行為學方法，評估大鼠生殖股神經生殖支移位海綿體神經后陰莖勃起功能的恢復情況。
　　方法：將30只成年雄性Sprague-Dawley大鼠（約250-300g）隨機分為三組，每組10只：假手術組，僅顯露雙側生殖股神經及海綿體神經，不

6、做離斷。損傷組：離斷雙側生殖股神經生殖支及海綿體神經，斷端以絲線結扎防止再生。神經移位組：離斷雙側生殖股神經生殖支及海綿體神經后，雙側生殖股神經生殖支近端與海綿體神經遠端行端端吻合。所有大鼠分別于術后4、8、12周行交配試驗，觀察并記錄大鼠的交配行為。術后12周，各組大鼠在熒光金注射一周后分別行海綿體內壓測定，電刺激相應神經時，監(jiān)測并記錄每只大鼠陰莖海綿體內壓變化及動脈血壓。
　　結果：術后12周，假手術組和神經移位組分別可觀察到

7、8只和7只大鼠有“插入”性行為；而損傷組中僅1只大鼠有“插入”性行為，明顯低于假手術組和神經移位組（P<0.05）。電刺激神經移位組大鼠生殖股神經生殖支（供體神經），可見海綿體壓顯著升高，海綿體內壓升高均值（ICP）為32.81±10.8mmHg，可達假手術組大鼠（62.11±7.67 mmHg）的53％；而電刺激損傷組大鼠離斷的海綿體神經近端，幾乎未見海綿體內壓升高，測得ICP為5.41±2.02 mmHg，明顯低于神經移位組和假手術

8、組（P<0.05）。假手術組、損傷組和神經移位組大鼠海綿體壓升高的均值與平均動脈血壓比值（ICP/MAP）分別為：0.63±0.08，0.05±0.02和0.32±0.10，其中神經移位組和假手術組測得的比值顯著高于損傷組（P<0.05）。
　　結論：生殖股神經生殖支移位海綿體神經后，部分大鼠可恢復自主交配行為，電刺激大鼠生殖股神經生殖支可引起海綿體內壓顯著升高，表明神經移位可部分修復大鼠的勃起功能。
　　第三部分：生殖股神

9、經生殖支移位海綿體神經后陰莖海綿體NOS的表達及組織形態(tài)學的改變
　　目的：探討生殖股神經生殖支移位海綿體神經后陰莖海綿體 NOS的表達以及組織形態(tài)學的改變。
　　方法：將30只成年雄性Sprague-Dawley大鼠（約250-300g）隨機分為三組，每組10只：假手術組，僅顯露雙側生殖股神經及海綿體神經，不做離斷。損傷組：離斷雙側生殖股神經生殖支及海綿體神經，斷端以絲線結扎防止再生。神經移位組：離斷雙側生殖股神經生殖支及

10、海綿體神經后，雙側生殖股神經生殖支近端與海綿體神經遠端行端端吻合。術后12周，行功能學評估后，分別截取三組大鼠的陰莖海綿體組織，并分為兩段，其中一段采用NADPH染色，于光學顯微鏡下觀察并計數大鼠每側陰莖背神經中藍染的NOS陽性神經纖維。另一段則用于Masson染色以了解各組大鼠陰莖海綿體組織形態(tài)學的改變。
　　結果：術后12周，神經移位組大鼠每側陰莖背神經中均可見大量NOS陽性神經纖維，平均數量為58.67±13.3，明顯高于損

11、傷組（15.53±7.0）（P<0.05），但低于假手術組（128.02±18.1）（P<0.05）。陰莖海綿體 Masson染色可見紅染的為平滑肌細胞，藍染的為膠原成分；三組大鼠陰莖海綿體切片內平滑肌和膠原的面積比分別為0.106±0.015，0.048±0.008和0.086±0.013，其中假手術組和神經移位組的比值顯著高于損傷組(P<0.05)。
　　結論：生殖股神經生殖支移位海綿體神經后，大量 NOS陽性的再生神經纖維重