溶血磷脂酸及其受體在妊娠期高血壓疾病的變化及意義.pdf

1、背景和目的 妊娠期高血壓疾病是影響妊娠預后最常見的妊娠期特有疾病，直接威脅母體及胎兒的生命安全，是孕產(chǎn)婦和圍生兒病率及死亡率的主要原因。迄今為止，妊娠期高血壓疾病的病因及病理機制尚不清楚，目前多認為其發(fā)病機制可能與血管內皮細胞損傷、自身免疫、凝血系統(tǒng)及纖溶系統(tǒng)失調等有關。正常妊娠隨著妊娠進展，孕婦血小板活化程度逐漸加強，而妊娠期高血壓疾病的血小板活化更加明顯，血液處于病理性的高凝狀態(tài)，血液流變學明顯異常，且與病情嚴重程度成正比。

2、導致妊娠高血壓疾病凝血功能異常的原因及機制至今仍不清楚，多年來一直是產(chǎn)科學者探究的課題之一。溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid，LPA)是近幾年研究較多的一種細胞間磷脂類信號分子，可通過G蛋白耦聯(lián)受體發(fā)揮廣泛而多樣的生物學功能。研究發(fā)現(xiàn)血液中的LPA可以來源于活化的血小板，而血小板的活化聚集促使血栓形成，因此LPA在缺血性腦卒中的診斷及中風預警方面中有重要的價值。而妊娠期高血壓疾病患者存在明顯的凝血功能異常，患者血中

3、是否存在LPA的異常變化，其變化與妊娠高血壓疾病的關系如何，以及LPA與血液凝固異常的關系及作用機制等等問題都是非常值得探討的課題。本文通過對60例妊娠期高血壓疾病患者血漿LPA水平進行檢測，并與正常晚期妊娠孕婦進行對比，以分析LPA在妊娠期高血壓疾病患者血漿中的變化，以及LPA與該病發(fā)生、發(fā)展、病情嚴重程度及預后的關系。同時應用免疫組化技術檢測70例妊娠期高血壓疾病患者胎盤組織中LPA受體——內皮分化基因(endothelial di

4、fferentiation geile，Edg)蛋白Edg4和Edg7的表達情況，以初步探討ISPA在妊娠期高血壓疾病的作用機制，該研究內容國內外尚未見報道。 材料與方法 1．選取2005年10月～2006年2月在鄭州大學一附院、三附院、鄭州市婦幼保健院診治的妊娠期高血壓疾病患者60例(妊娠期高血壓20例，子癇前期輕度20例，子癇前期重度20例)、20例正常晚期妊娠孕婦作為研究對象。收集70例妊娠期高血壓疾病患者的胎盤檢

5、測LPA受體。 2．采用生化法檢測各組患者血漿LPA水平：取患者空腹靜脈血約4ml，按LPA測定試劑說明的步驟先將血液置于抗凝管中，8000r/min離心10min，準確吸取上清液1ml，然后抽提磷脂成分，濃縮分離，最后加入特定顯色劑后置于90℃水浴放置5min，取出后溫室放置35min，在波長為636nm處比色。LPA測定試劑由北京泰福仕科技開發(fā)公司生產(chǎn)，方法為生化法，儀器采用722型分光光度計。參考值范圍：正常<2．9 μ

6、mol/L，臨界值2．9～3．2μ mol/L，異常>3．2μ mol/L。 3．應用免疫組織化學(SP法)檢測該70例妊娠期高血壓疾病患者胎盤組織(妊娠高血壓疾病組)和20例正常妊娠胎盤組織(對照組)中LPA受體Edg4與Edg7的表達情況，并對結果進行統(tǒng)計分析，并用Shimizu法對其進行定量分析。 4．統(tǒng)計學處理：用統(tǒng)計軟件SPSS11.0進行統(tǒng)計分析，測定結果以x±s表示，采用單因素方差分析、最小顯著差(LSD)

7、t檢驗及x<'2>檢驗進行統(tǒng)計處理，受體表達強度采用校正x<'2>檢驗方法，以α=0.05為檢驗標準。 結果 1．妊娠期高血壓疾病患者血漿LPA水平測定 1．1 LPA水平測試結果20例正常晚期妊娠婦女的血漿LPA平均值為(3．5±0．3)μ mol/L，大于臨界值3．2 μ mol/L，較正常非孕婦女升高，P<0.05；妊娠期高血壓疾病組血漿LPA水平明顯升高，妊娠期高血壓組(4．6±0．4)μ mol/L、子

8、癇前期輕度組(6．1±0．4)μmol/L、子癇前期重度組(9．0±0．6)μ mol/L與正常晚期妊娠婦女相比，P值均<0.05，并且隨著妊娠期高血壓疾病病情加重，血漿LPA水平進一步升高，具有顯著差異，組內P值均<0.05。 1．2 LPA與新生兒體重、阿氏評分及預后： 從試驗結果、統(tǒng)計分析及臨床資料來看，妊娠期高血壓疾病孕婦血漿LPA越高，患者病情越重，表現(xiàn)為血壓持續(xù)升高，藥物治療效果越差，胎兒宮內窘迫、胎兒發(fā)育遲

9、緩的發(fā)生率越高，常需提前終止妊娠。新生兒低體重率高，阿氏評分降低，新生兒死亡率增高。我們測定的結果提示：當LPA升高至4．40μ mol/L，是發(fā)生妊娠期高血壓疾病的臨界值；當LPA達到5.60μmol/L時妊娠期高血壓疾病多己處于子癇前期輕度階段，應及時采取措施予以治療；當LPA達到8.50μmol/L，多數(shù)患者已發(fā)展到子癇前期重度階段；當LPA超過9.30μmol/時，提示病情嚴重，藥物治療效果不佳，應及時終止妊娠，以降低圍生兒和孕

10、產(chǎn)婦死亡率。 2.溶血磷脂酸(LPA)受體在胎盤組織中的表達情況 2.1表達部位：Edg4與Edg7主要表達于胎盤絨毛滋養(yǎng)細胞及蛻膜細胞的細胞質和細胞膜，免疫組化染色呈淺黃色或棕黃色。 2.2 Edg4和Edg7在胎盤絨毛滋養(yǎng)細胞中的表達陽性率：正常晚孕組分別為25﹪和20﹪，妊娠期高血壓組分別為60﹪和40﹪，輕度子癇前期組分別為80﹪和65﹪，重度子癇前期組分別為83.3﹪和86.7﹪。輕度子癇前期組及重度

11、子癇前期組陽性率明顯高于正常晚孕組，兩組分別比較，差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05，Edg4:x<'2>17.014；Edg7：x<'2>=22.222)：妊娠期高血壓組與正常晚孕組比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05，Edg4：x<'2>=5.013：Edg7：x<'2>=1.905)；妊娠期高血壓組、輕度子癇前期組及重度子癇前期組Edg4、Edg7的陽性表達率隨病情加重逐漸升高，但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 2.3 E

12、dg4和Edg7在胎盤蛻膜細胞中的表達陽性率：正常晚孕組分別為20﹪和25﹪，妊娠期高血壓組分別為55﹪和50﹪，輕度子癇前期組分別為70﹪和55﹪，重度子癇前期組分別為83.3﹪和73.3﹪。輕度子癇前期組及重度子癇前期組陽性率明顯高于正常晚孕組，兩組分別比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05，Edg4：x<'2>=13.675；Edg7：x<'2>=17.014)；妊娠期高血壓組與正常晚孕組比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05，Edg

13、4：x<'2>=5.227；Edg7.x<'2>=2.667)；妊娠高血壓組、輕度子癇前期組及重度子癇前期組Edg4、Edg7的陽性表達率隨病情加重逐漸升高，但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 結論 1.妊娠期高血壓疾病患者血漿LPA水平明顯升高，高于正常妊娠婦女。且與病情有關，LPA水平越高，提示病情越重。 2.妊娠期高血壓疾病患者胎盤組織中溶血磷脂酸受體蛋白Edg4、Edg7呈高表達。且其表達程度與病情有關