溶血磷脂酸受體在卵巢上皮性腫瘤中的表達(dá)及生物學(xué)意義.pdf

1、河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文溶血磷脂酸受體在卵巢上皮性腫瘤中的表達(dá)及生物學(xué)意義姓名：劉金申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師：吳小華單保恩20060301中文摘要癌的治療尋找新的靶點(diǎn)。本課題采用RTPCR和WestemB10t兩種方法，檢測(cè)LPA。、LPA2及LPA3三種受體在卵巢上皮癌、卵巢良性上皮腫瘤及卵巢正常上皮中的表達(dá)，并分析LPA與卵巢癌的惡性生物學(xué)行為之間的關(guān)系。方法：本課題實(shí)驗(yàn)所選用的研究標(biāo)本取自2003年6月至2004年

2、12月河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院婦科的手術(shù)切除標(biāo)本，均經(jīng)術(shù)后病理確診的卵巢癌42例(漿液性囊腺癌18例，宮內(nèi)膜樣癌15例，粘液性囊腺癌9例)，卵巢良性上皮性腫瘤8例(漿液性囊腺瘤3例，粘液性囊腺瘤5例)及正常卵巢上皮8例(均取自子宮肌瘤患者，取卵巢表面約2—3mm厚的皮質(zhì))。按FIG02000手術(shù)病理分期標(biāo)準(zhǔn)，I—II期9例，III—IV期33例。在病理分級(jí)上Gl級(jí)6例，G2級(jí)25例，G3級(jí)1l例。所有組織標(biāo)本于離體后2小時(shí)內(nèi)放入液氮中驟凍，

3、而后保存于一80℃冰箱中待用。(1)：反轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應(yīng)(RT—PcR)檢測(cè)LPA】、LPA2和LPA3的mRNA的轉(zhuǎn)錄水平。從組織標(biāo)本中提取總RNA，并通過電泳和紫外分光光度儀鑒定RNA的完整性及純度。待擴(kuò)增引物據(jù)NcBIGenBallk的cDNA文庫(kù)：LPAl擴(kuò)增片斷長(zhǎng)度為342bp，57一ATCGGGATACCATGATGAGTC一37(U)，57TCCGTTCTAAACCACAGAGTG一37(L)；LPA2擴(kuò)增片斷長(zhǎng)度為29

4、9bp，57一GCTACCGAGAGACCACGCTC一37(U1，5’CTGGGCAGAGGATGTATAGTG一37(L)；LPA3擴(kuò)增長(zhǎng)度為379bp，57。ACAccCATGAAGcTAATGAAG一37(U)，57AGGCATCCAGAGTTTAGGAAG3’(L1；0_actin擴(kuò)增長(zhǎng)度為838bp，57ATCTGGcAcCACACCTTCTACAA—TGAGCTGCG一37fU)，57一CGTACTCCTGCTTGATCC