血紅栓菌發(fā)酵產(chǎn)漆酶的條件及酶學(xué)特性的研究.pdf

1、本文以血紅栓菌為材料，對(duì)液體和固體發(fā)酵產(chǎn)漆酶條件進(jìn)行優(yōu)化篩選，同時(shí)對(duì)該酶的酶學(xué)性質(zhì)進(jìn)行了研究。本研究旨在優(yōu)化血紅栓菌漆酶的發(fā)酵工藝，提高漆酶產(chǎn)量，為血紅栓菌漆酶的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。通過(guò)試驗(yàn)取得如下結(jié)果:
　　(1)對(duì)血紅栓菌液體發(fā)酵條件進(jìn)行了優(yōu)化，首先通過(guò)單因素試驗(yàn)優(yōu)化了培養(yǎng)基組分，再經(jīng)過(guò)正交試驗(yàn)對(duì)培養(yǎng)基組分濃度和液體培養(yǎng)環(huán)境進(jìn)行了進(jìn)一步優(yōu)化，得到的優(yōu)化培養(yǎng)基配方為葡萄糖15g，蔗糖15g，蛋白胨2g，NH4NO32g，KH

2、2PO43g，MgSO41.5g，CuSO42mmol/L。適宜的液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)環(huán)境條件為:pH值為5，裝液量為110mL，接種量4％，28℃條件下培養(yǎng)，發(fā)酵液漆酶酶活為169.63U/m L，菌絲提取的粗酶液酶活為150.37U/mL，比優(yōu)化前提高了3倍。
　　(2)研究了添加木屑、棉籽皮和玉米芯三種木質(zhì)纖維素對(duì)血紅栓菌液體發(fā)酵產(chǎn)漆酶的影響，結(jié)果表明，木屑和棉籽皮在第七天酶活力達(dá)到最高，玉米芯在第六天漆酶活力達(dá)到最高。通過(guò)對(duì)比分析

3、得出，含木屑的完全培養(yǎng)基酶活高于其他兩種，因此木屑對(duì)血紅栓菌分泌漆酶的誘導(dǎo)能力強(qiáng)于棉籽皮和玉米芯。
　　(3)對(duì)血紅栓菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基和添加不同木質(zhì)纖維素平板培養(yǎng)基進(jìn)行優(yōu)化，研究結(jié)果表明，含木屑的平板培養(yǎng)基產(chǎn)酶活最高，優(yōu)化篩選的最優(yōu)固體發(fā)酵培養(yǎng)基配方為木屑58％，棉子皮10％，玉米芯10％，麥麩20％，石膏1％，石灰1％，硫酸銅1.5mmol/L，酶活為202.22U/mL。
　　(4)酶學(xué)性質(zhì)研究結(jié)果表明，該漆酶的最適反應(yīng)