產(chǎn)殼聚糖酶菌株的篩選鑒定、產(chǎn)酶發(fā)酵條件的優(yōu)化及酶學(xué)性質(zhì)研究.pdf

1、殼聚糖(chitosan)及其降解產(chǎn)物因具有優(yōu)良的物理特性和生物活性而被廣泛關(guān)注。本研究通過(guò)平板透明圈初篩、搖瓶復(fù)篩方法，從青島海岸土壤中分離篩選到1株產(chǎn)殼聚糖酶活性較高的細(xì)菌K1，并對(duì)其產(chǎn)酶發(fā)酵條件進(jìn)行了單因子與響應(yīng)曲面優(yōu)化分析試驗(yàn)。結(jié)果表明:經(jīng)部分理化性質(zhì)測(cè)定和16S rDNA序列分析(GenBank接收號(hào):KC489157)，K1菌株被鑒定為Mitsuaria sp.K1;該菌株最適產(chǎn)酶發(fā)酵條件為:碳源（1％粉末殼聚糖，w/v）∶

2、氮源(0.5％KNO3，w/v)=2∶1，培養(yǎng)溫度25℃，起始pH6.5，培養(yǎng)時(shí)間25h，接種量3.0％(v/v)，裝液量100ml;在最適條件下，K1菌株發(fā)酵液中殼聚糖酶活最高可達(dá)到11.56 U/ml，較初始菌提高了5倍。與已有報(bào)道相比，該菌產(chǎn)酶發(fā)酵溫度降低了5-10℃，最高產(chǎn)酶周期縮短了1-2倍，因此具有潛在工業(yè)發(fā)酵應(yīng)用價(jià)值。另外，還對(duì)K1菌株發(fā)酵粗酶液中殼聚糖酶的部分酶學(xué)性質(zhì)進(jìn)行了初步研究，結(jié)果表明:該酶最適底物濃度為1.5％;