產纖維素酶兼性厭氧芽孢桿菌的分離篩選及在動物生產上的初步應用.pdf

1、本研究是為了篩選出產纖維素酶活性較高、而對氧氣需求不高的兼性厭氧芽孢桿菌。試驗以新鮮奶牛糞便為樣品，利用芽孢桿菌耐高溫的特性，經80℃水浴殺死非芽孢菌，從而分離篩選出一批芽孢桿菌。采用剛果紅平板染色法，并通過對透明圈的測定和計算，選出13株具有較高纖維素酶活性的菌株。在對這批菌株進行生理生化鑒定的基礎上，選出一株產纖維素酶活性較高、兼性厭氧梭狀芽孢桿菌。將其制成菌懸液，按0.5ml/只的劑量，腹腔注射平均體重20g的小鼠，測定出對小鼠的

2、半數致死量為2.3×10<'10>/ml，按每克日糧中活菌(或孢子)數為2×10<'5>～10<'6>個的標準，證實該菌株添加到動物日糧中具有較高的安全性。 對篩選出的菌株進行產纖維素酶條件的研究，測定影響細菌產酶的幾種主要因素(碳源、氮源、發(fā)酵溫度、發(fā)酵時間、培養(yǎng)基初始PH、接種量)在不同條件下對酶活力的影響，從而篩選出最適產酶條件。首先分別測定單因素條件下每種因素對纖維素酶活的影響，根據單因素條件下的測定結果，設計6因素三水

3、平正交試驗(L<,27>(3<'13>))對其產酶條件進行了優(yōu)化，從而篩選出最佳發(fā)酵產酶培養(yǎng)條件為：碳源：麩皮1％，氮源：牛肉膏2％，初始pH：8，發(fā)酵溫度：42℃，發(fā)酵時間：36h，接種量3％。 將篩選出的菌株制成活菌制劑，選用24只生理指標基本一致的斷奶家兔進行飼喂試驗，試驗分對照組(基礎日糧)和實驗組(添加活菌制劑)，飼喂30天后，計算增重情況和飼料報酬，測定糞便和不同腸段中纖維素酶、蛋白酶、淀粉酶活性，比較兩組間差異性。

4、 結果表明，試驗組與對照組相比，兩組間增重效果和料重比均有明顯差異，經統(tǒng)計分析差異極顯著(P<0.05)。其中，試驗組日增重比對照組提高7.91g/只，而料重比下降了15.2％，說明在家兔日糧中添加由分離菌株制成的活菌制劑后，有明顯的促生長作用，而且試驗組曰糧得到了更有效的消化吸收。 酶活力的測定結果表明：糞便及腸道中纖維素酶活力有明顯提高，試驗組與對照組差異極顯著(P<0.01)。蛋白酶活力則無明顯變化，試驗組與對照組